Táibléad IGF 1 LR3

An chomhpháirt lárnach deTáibléad IGF 1 LR3, IGF-1 LR3 (Long R3-IGF-1), analóg fachtóir fáis-1 cosúil le inslin a shintéisiú go saorga a úsáidtear go coitianta i dtaighde eolaíoch nó i suíomhanna leighis sonracha i bhfoirm instealltaí. Is polaipeiptíd alcaileach slabhra amháin é atá comhdhéanta de 70 aimínaigéid, a shintéisítear go príomha ag an ae agus a rialaítear le hormón fáis (GH). Tá a struchtúr cosúil le insulin, ach tá a ghníomhaíocht chun fás a chur chun cinn i bhfad níos airde ná inslin. Gníomhaíonn sé cosáin chomharthaíochta iartheachtacha (amhail AKT agus MAPK) trí cheangal a dhéanamh ar ghabhdóirí tyrosine kinase (IGF-1R), iomadú cille, difreáil agus rialáil meitibileach a chur chun cinn. Mar bhreiseán fáis, méadaíonn IGF-1 LR3 go suntasach an ráta iomadú agus táirgeadh próitéin athchuingreach HEK293, CHO agus cealla eile, agus úsáidtear go forleathan é sa tionscal bithchógaisíochta. I múnlaí luch transgenic, úsáidtear LR3 chun staidéar a dhéanamh ar fhorbairt muscle, rialáil meitibileach, agus meicníochtaí aosaithe. Mar shampla, is féidir le hinstealladh fadtéarmach LR3 moill a chur ar atrophy muscle agus feabhas a chur ar chumas mótair lucha scothaosta.

IGF 1 LR3 COA

Is peptide an-ghníomhach é IGF-1 LR3 (fachtóir fáis slabhra fada cosúil le hinsline daonna) atá modhnaithe go saorga. Tríd an seicheamh aimínaigéad atá bunaithe ar IGF-1 daonna a mhodhnú, feabhsaíonn sé go mór cobhsaíocht agus gníomhaíocht bhitheolaíoch, agus tá luach iarratais tábhachtach aige i réimsí cosúil le taighde agus forbairt bithleighis, cultúr cille, etc.Táibléad IGF 1 LR3(Is éard atá in inslin dhaonna slabhra fada-cosúil le táibléid fachtóir fáis) innealtóireacht chórais chasta a chomhtháthaíonn iliomad réimsí teicneolaíochta ar nós innealtóireacht ghéiniteach, próisis fhoirmithe, agus rialú cáilíochta

Is féidir próiseas déantúsaíochta táibléad IGF-1 LR3 a roinnt ina thrí chroíchéim: ullmhú amhábhar, múnlú foirmithe, sciath agus pacáistiú. Áirítear le gach céim próisis cheimiceacha ilfhíneáil agus éilíonn rialú docht ar pharaiméadair phróisis chun aonfhoirmeacht cáilíochta an táirge a chinntiú.

Ullmhúchán amhábhar: Léiriú agus íonú innealtóireachta géine

Ní féidir IGF-1 LR3, mar shubstaint peiptíde, a tháirgeadh go héifeachtach ar scála mór trí shintéis cheimiceach. Is é an modh príomhshrutha ná teicneolaíocht slonn athchuingreach innealtóireachta géiniteach a úsáid le haghaidh ullmhúcháin, agus tá a phróiseas tar éis claochlú aibí a bhaint amach ó thástáil ar scála beag saotharlainne go tástáil phíolótach umar choipeadh 150L. Is iad seo a leanas na céimeanna sonracha:

Tógáil córas slonn

Ba cheart tús áite a thabhairt d’úsáid córais abairte eucaryotic, agus an brú Pichia pastoris GS115 a úsáidtear go coitianta mar chill óstach. Trí úsáid a bhaint as teicneolaíocht athcheangail DNA, rinneadh an móilín aigéid núicléigh a ionchódú IGF-1 LR3 a chlónáil isteach sa pPICZ A plasmid chun an veicteoir slonn pPICZ-LR3IGF-1 a thógáil. Ní mór go mbeadh gnéithe cosúil le tionscnóirí agus géinte marcála roghnacha (cosúil le géinte friotaíochta Zeocin) sa veicteoir chun léiriú cobhsaí na sprice a chinntiú. Úsáideann roinnt cuideachtaí an córas léirithe E. coli freisin, mar shampla táirgí Wuhan Pronosai, a bhaineann amach léiriú próitéiní sprice trí E. coli.

Coipeadh ard-dlúis

Is é an próiseas coipeadh an eochair do tháirgeadh amhábhar, agus is gá coipeadh baisc chothaithe a bhaint amach in umair choipeadh 10-150L. Is iad na croípharaiméadair optamaithe ná toirt ionaclaithe 4% agus tiúchan IPTG de 0.8 mmol/L. Is éard atá i gceist leis an modh ionduchtaithe ná lachtós agus IPTG a cheangal, le ham ionduchtaithe 4 uair an chloig. Le linn an phróisis choipeadh, déantar an ocsaigin tuaslagtha a rialú ag 40% -60%, agus coinnítear an luach pH cobhsaí. Tar éis 12 uair an chloig de choipeadh, is féidir leis an meáchan fliuch baictéarach 22-24g/L a bhaint amach, agus is ionann leibhéal slonn na próitéine sprice agus 25% den phróitéin iomlán. Le linn an phróisis choipeadh, tá gá le monatóireacht fhíor-ama ar pharaiméadair mar bithmhais baictéarach, ocsaigin tuaslagtha, pH, etc. chun soláthar cothaitheach a chothabháil trí chóras beathaithe uathoibríoch agus carnadh meitibilítí a chuireann bac ar léiriú próitéine a sheachaint.

Ilroinnt baictéarach agus cuimsiú comhlacht cóireála

Tar éis coipeadh, bailíodh na cealla baictéarach trí lártheifneoiriú agus sonicated chun na cealla a bhriseadh síos, ag scaoileadh comhlachtaí cuimsithe ina bhfuil an spriocphróitéin. Chun íonacht na gcomhlachtaí cuimsithe a fheabhsú, tá gá le trí nigh grádán. Ar dtús, nigh faoi dhó le úiré 2mol/L, agus ansin nigh uair amháin le maolán PBS. Tar éis cóireála, is féidir an cion de phróitéin sprice sna comhlachtaí cuimsithe a mhéadú go 50%. Ina dhiaidh sin, díscaoileadh na comhlachtaí cuimsithe i dtuaslagán dínádúraithe (pH 8.0) ina raibh 8mol/L úiré, 0.1mol/L Tris HCl, agus 10mmol/L DTT chun a chinntiú go n-osclófaí próitéin iomlán agus chun ullmhú le haghaidh athfhillte ina dhiaidh sin.

Athnuthú agus íonú próitéine

Úsáidtear an modh athfhillte caolaithe le haghaidh athfhillte, agus is é an fhoirmle réitigh athfhillte is oiriúnaí ná 0.1mol/L Tris HCl, 1mmol/L EDTA, glutathione ocsaídithe 3mmol/L, glutathione laghdaithe 1mmol/L, agus glicín 1% (pH 8.0). Tar éis caolú, déantar an próitéin a mhúscailt ag 4 céim ar feadh 12 uair an chloig chun fillte ceart a chur chun cinn. Sa phróiseas íonú, úsáidtear an próiseas teaglaim crómatagrafaíochta. Ar dtús, baintear neamhíonachtaí móilíneacha beaga le crómatagrafaíocht glóthach Sephadex G - 50, agus ansin iad a íonú tuilleadh le crómatagrafaíocht malairte ian SP - Sepharose F. F. Ar deireadh, faightear próitéin ard-íonachta IGF -1 LR3. Tá a meáchan móilíneach agus seicheamh aimínaigéad comhsheasmhach go hiomlán leis an luach teoiriciúil trí bhrath.

Púdar triomaithe a ullmhú reo

Déileáiltear leis an bpróitéin íonaithe le teicneolaíocht a thriomú reoite, agus déantar an t-uisce a sublimated go díreach ó sholad go gás faoi theocht íseal agus timpeallacht brú íseal, rud a chruthaíonn púdar criostalach bán cobhsaí. Cinntíonn an próiseas seo go bhfanann próitéiní gníomhach le linn stórála agus iompair. Is féidir púdar triomaithe reoite a stóráil go cobhsaí ar feadh roinnt seachtainí ag teocht an tseomra agus is féidir é a stóráil ar feadh roinnt blianta ag -80 céim.

Múnlú foirmlithe: próiseas lárnach in ullmhú táibléid

Na hairíonna peptide deTáibléad IGF 1 LR3é a dhéanamh íogair don timpeallacht ghastraistéigeach, agus ní mór do fhoirmlithe táibléid dul i ngleic le saincheisteanna amhail bith-infhaighteacht íseal agus so-ghabhálacht do dhíghrádú einsímeach. Dá bhrí sin, tá gá le barrfheabhsú spriocdhírithe i ndearadh oidis agus i roghnú próisis. Tagraíonn próiseas múnlaithe a fhoirmithe don phróiseas ginearálta táibléad peptide agus déantar é a choigeartú de réir a saintréithe féin, mar a leanas:

1

 

Dearadh oideas agus scagadh excipient

Ba cheart go gcuirfí san áireamh i ndearadh an oideas cobhsaíocht próitéin, ráta díscaoilte agus foirmiúlacht. Ba cheart ceallalóis microcrystalline agus lachtós a úsáid mar chaolaitheoirí, le cóimheas de thart ar 3: 1 chun cruas táibléid a chinntiú agus díscaoileadh a éascú; Úsáideann an greamachán tuaslagán uiscí 5% polyvinylpyrrolidone K30 chun damáiste a sheachaint don struchtúr próitéine le tuaslagóirí orgánacha; Is é an díshuiteálaí a roghnaíodh ná sóidiam carboxymethyl cellulose tras-nasctha, le méid breise de 3% -5%, chun díscaoileadh tapa an táibléid sa chonair gastrointestinal a chinntiú; Is é an bealaidh a úsáidtear stearate maignéisiam, le dáileog de 0.5%, chun cuimilte a laghdú le linn comhbhrú; Ag cur meglumine 1% -2% ag an am céanna mar thuaslagóir chun tuaslagthacht uisce IGF-1 LR3 a fheabhsú.

2

 

Crushing agus sieving

Meilt an púdar reoite-triomaithe IGF-1 LR3 ar leithligh trí bhrúiteoir srutha aeir, ag rialú méid na gcáithníní D90 den amhábhar ag 20-30 μ m, agus ag meaitseáil méid cáithníní na n-easpaig leis an amhábhar chun meascadh míchothrom a sheachaint mar gheall ar dhifríochtaí méid na gcáithníní. Tar éis a bhrúite, pas a fháil trí criathar 80 mogalra chun cáithníní clumped agus neamhíonachtaí a bhaint, ag cinntiú sreabhach an ábhair.

3

 

Meascadh agus gránú

Meascadh an t-amhábhar IGF-1 LR3 ar dtús le caolaitheoir agus disintegrant ag baint úsáide as modh incriminteach comhionann ar feadh 30 nóiméad chun scaipeadh aonfhoirmeach an amhábhar a chinntiú. Ina dhiaidh sin, cuireadh greamachán polyvinylpyrrolidone K30 leis agus rinneadh gránú fliuch ag baint úsáide as granulator swing (criathar 16 mogalra) le haghaidh gránú. Ba chóir cáithníní fliuch a thriomú ag 40-45 céim ar feadh 2-3 uair an chloig, le cion taise rialaithe de 3% -5%. Ba cheart an teocht a thriomú a rialú go docht chun dínádúrú próitéine de bharr teocht ard a sheachaint. Tar éis a thriomú, déantar na cáithníní a chriathar trí chriathar 20 mogalra chun cáithníní móra agus púdar fíneáil a bhaint.

4

 

Táibléad ag brú

Roghnaigh dísle cuasach éadomhain 8mm le haghaidh brú táibléid, le fórsa brúite á rialú ag 18-20KN, cruas táibléid á chothabháil ag 60-80N, agus difríocht meáchain na táibléid á rialú laistigh de ± 3%. Le linn an phróisis brúite táibléid, tá gá le monatóireacht fhíor-ama ar mheáchan, cruas agus brittleness na táibléid, le sampláil agus tástáil gach 15 nóiméad chun lochtanna cáilíochta de bharr luaineachtaí i bparaiméadar trealaimh a sheachaint. Ag an am céanna, ní mór cóireáil aiseipteach a dhéanamh ar an bpreas táibléad, agus ba cheart an timpeallacht táirgthe a rialú i limistéar glan D-leibhéal le teocht 18-26 céim agus taiseachas coibhneasta 45% -65%.

5

 

Cumhdach

Chun IGF-1 LR3 a chosaint ó dhamáiste ó einsímí gastrointestinal, úsáidtear próiseas sciath scannáin tanaí. Úsáideann an tuaslagán sciath OBA premix, caolaithe le huisce íonaithe go tiúchan 15%, agus brataithe ag baint úsáide as meaisín sciath éifeachtach. Le linn an phróisis sciath, ba cheart teocht an aeir inlet a rialú ag 45-50 céim, teocht an aeir asraon ag 30-35 céim, an ráta spraeála 5-8ml/min, agus ba cheart go n-ardódh an meáchan sciath 2-3%. Tá dromchla an táibléad brataithe réidh, rud a d'fhéadfadh moill a chur ar dhíscaoileadh gastrach, drugaí a scaoileadh go tapa sa intestine, agus bith-infhaighteacht a fheabhsú.

 

Trealamh agus feidhmeanna lárnacha táirgthe

An trealamh táirgeachta le haghaidhTáibléad IGF 1 LR3clúdaíonn sé réimsí iolracha amhail coipeadh bitheolaíoch, múnlú foirmlithe, agus cigireacht agus tástáil. Bíonn tionchar díreach ag cruinneas agus cobhsaíocht an trealaimh ar chaighdeán an táirge. Is iad seo a leanas liosta agus feidhmeanna an trealaimh ar leith:

Clibeanna Te: igf 1 lr3 tablet, soláthraithe, monaróirí, monarcha, mórdhíola, a cheannach, praghas, mórchóir, ar díol