Aigéad L-thioglutamicis comhdhúil táirge nádúrtha é a thiontaítear ó réamhtheachtaithe cosúil le glucosinolate i glasraí grannymonda cosúil le cál, Greens mustaird agus brocailí. Tá éagsúlacht éifeachtaí sláinte aige, agus úsáidtear go forleathan é chun galair ainsealacha a chosc mar ailse, galar cardashoithíoch, agus diaibéiteas. Tá sé le fáil go forleathan i bplandaí cruciferous, mar shampla cál, cóilis, agus cabáiste. Tá go leor gníomhaíochtaí cógaseolaíochta aige, mar shampla anticancer, anti-inflammatory, antioxidative, neuroprotective, etc. Dá bhrí sin, tharraing an modh sintéiseach d'aigéad L-thioglutamic go leor aird.
Faoi láthair, is féidir na modhanna chun aigéad L-thioglutamic a shintéisiú a roinnt ina dhá chatagóir: coipeadh bitheolaíoch agus sintéis cheimiceach. Déantar cur síos mionsonraithe ar an dá mhodh seo thíos.
Modh coipeadh bitheolaíoch L-Sulforaphane:
Is modh é an modh coipeadh bitheolaíoch chun comhdhúile a shintéisiú le miocrorgánaigh. Trí tréithchineálacha baictéaracha a scagadh agus leas iomlán a bhaint as coinníollacha cultúir, is féidir leis na miocrorgánaigh aigéad L-thioglutamach a tháirgeadh le linn an phróisis choipeadh. Anois tá sé faighte amach gur féidir le go leor tréithchineálacha aigéad L-thioglutamic a shintéisiú, mar shampla Escherichia coli, Streptococcus thermophilus agus mar sin de. Ina measc, is é an modh is coitianta chun aigéad L-thioglutamach a shintéisiú le tréithchineálacha arna léiriú ag Escherichia coli. Seo a leanas céimeanna sonracha:
1. Déan tréithchineálacha a tháirgeann L-thioglutamate, amhail Escherichia coli, a leithlisiú ón ithir nó ó fhíochán planda;
2. Coinníollacha meánacha agus cultúir oiriúnacha a ghlacadh, mar shampla teocht, luach pH, am cultúir, etc., chun Escherichia coli a chothú;
3. Déan brat choipeadh Escherichia coli a fhómhar, déan próiseáil agus íonú áirithe, agus faigh aigéad L-thioglutamic.
Modh sintéise ceimiceach L-Sulforaphane:
Is é an modh sintéise ceimiceach ná an modh imoibriúcháin mhóilíneach ceimiceach a úsáid chun aigéad L-thioglutamach a shintéisiú trí bhealaí sintéiseacha éagsúla. Faoi láthair, roinntear modhanna sintéise ceimiceacha go príomha i gceithre chineál: modh salann choilín, modh clóiríd sulfairile, modh laghdaithe carbóinile, agus modh agarose sulfate.
1. Modh salann choilín:
Tá an modh seo ar cheann de na modhanna sintéiseacha a úsáidtear go coitianta. Lean ar aghaidh mar seo a leanas:
① Ar dtús, imoibrítear L-methionine agus choilín faoi choinníollacha aigéadacha chun ionadach nítrigine annamh d'aigéad L-thioglutamach a ghiniúint.
② Ionadaigh nítrigine a théamh agus a hidrealú in aigéad L-thioglutamach faoi choinníollacha alcaileach.
Is é an leas a bhaint as an modh seo ná go bhfuil an t-imoibriú simplí agus éasca a mháistir, ach tá an toradh íseal.
2. Modh clóiríd sulfónil:
Úsáideann an modh seo imoibriú ionadú leictreafail chun aigéad L-thioglutamach a shintéisiú. Lean ar aghaidh mar seo a leanas:
① Imoibriú L-methionine agus clóiríd sulfonyl faoi choinníollacha alcaileach chun sulfinate aigéad L-thioglutamic a fháil.
② Déantar an sulfinate a hidrealú faoi choinníollacha alcaileach chun aigéad L-thioglutamach a ghiniúint.
Is é an leas a bhaint as an modh seo ná go bhfuil an t-imoibriú éasca le rialú agus go bhfuil an toradh ard, ach ní mór clóiríd sulfonyl tocsaineach a úsáid.
3. Modh laghdaithe carbóinile:
Is é an modh imoibriú laghdaithe a úsáid chun aigéad L-thioglutamach a shintéisiú. Lean ar aghaidh mar seo a leanas:
① Imoibríonn L-methionine le haicéatóinín chun pirimidín pirimidín pirimidín amháin agus pirimidín pirimidín a ghiniúint shulfáit amháin ag an am céanna
②Pirimidín pirimidín-2-ga-4-un-5-laghdaítear sulfáit chun aigéad L-thioglútamach a fháil.
4. Modh sulfáit agarose: Is é an modh seo imoibriú L-methionine agus sulfáit agarose faoi choinníollacha aigéadacha chun aigéad L-thioglutamic a ghiniúint. Mar gheall ar ghníomhaíocht mhaith sulfáit chatalaíoch, feabhsaítear an éifeachtúlacht imoibrithe agus an roghnaíocht. Níos airde, ach níos deacra a oibriú.
I dtaighde eolaíoch, tá sé an-tábhachtach L-sulforaphane a bhrath. Ina measc, tá an modh sulfáit agarose ar cheann de na modhanna braite clasaiceach. Déanfar cur síos mionsonraithe thíos ar an modh sulfáit agarose agus a céimeanna.
Prionsabal turgnamhach
Tá an modh sulfáit agarose bunaithe ar fhoirmiú casta buí de L-thiogalactopicrin agus sulfáit bhairiam, salann a foirmíodh faoi choinníollacha aigéadacha, ag baint úsáide as agarose mar scafall chun L-An modh sulforaphane a scaradh. Tá an modh bunaithe ar an bhfíric, faoi choinníollacha aigéadacha, nach bhfuil an coimpléasc buí atá déanta ag imoibriú sulfáit bhairiam agus L-sulforaphane intuaslagtha go héasca in uisce agus deascann sé in agarose, chun L-sulforaphane a scaradh agus a bhrath.
Céimeanna turgnamhacha:
Céim 1: Ullmhaigh an fionraí agarose-bhairiam sulfáit
Meáigh méid cuí agarose agus sulfáit bhairiam, cuir méid áirithe uisce driogtha tar éis a mheascadh agus corraigh go maith, teas go dtí go tuaslagtha nó measctha go cothrom, scag an fionraí le scagaire le méid pore de 0.22um, agus ansin boil ar feadh 3 go 5 nóiméad. Nuair a fhuaraíonn an fionraí go dtí faoi bhun 50 céim ach nach soladaíonn sé fós, doirt an tuaslagán isteach i mias Petri agus cuir ag teocht an tseomra é go dtí go soladaíonn sé.
Céim 2: Ullmhú agus próiseáil shamplach:
Meáigh an sampla nó an caighdeán atá le tástáil, cuir go leor {{{0}} leis.0 Tuaslagán pireafosfáit sóidiam 1 M le tuaslagadh, cuir toirt comhfhreagrach clóraform san eastóscán, lártheifneoir ar feadh 10-15 nóiméad , bain an leacht ciseal uachtarach, galú an clóraform chun an t-iarmhar a bhailiú, cuir 2 mL uisce agus 2 mL d'aigéad hidreaclórach tiubhaithe, a bhaintear arís le clóraform, lártheifneoirithe, agus tógadh an ciseal uachtarach. Tóg 24mL den leacht uachtarach, cuir 0.2 mL de thuaslagán níotráite copair 2 faoin gcéad agus 0.4 mL de thuaslagán níotráite luaidhe 5 faoin gcéad, sliocht uair amháin le clóraform, lártheifneoir, agus tóg an leacht uachtarach, is féidir a úsáid mar shampla turgnamhach le haghaidh tástála.
Céim 3: Turgnamh athanailíse:
Cuireadh na samplaí leis an bhfionraí sulfáit agarose-bhairiam agus téite i ndabhach uisce chun soladú ag 80 céim ar feadh 2 uair an chloig. Tar éis don sampla a bheith soladach, déantar an fionraí agarose-barium sulfate a fhuaraithe go teocht an tseomra, agus déantar an casta sampla sulfáit agarose-barium a thuaslagadh faoi choinníollacha maolánacha aigéad citreach agus salann amóiniam. Ar deireadh, sruthlaigh in uisce go seicheamhach, agus déan iniúchadh amhairc ar dhath an choimpléasc sa sféar agairóis.
Céim 4: Anailís ar thorthaí:
Déan ionsúchán an scagáit a thomhas tar éis athanailíse chun cuar caighdeánach a dhéanamh, agus ar an gcaoi sin an t-ábhar L-sulforaphane a fháil.
Is modh clasaiceach é an modh sulfáit agarose chun L-sulforaphane a scaradh agus a bhrath. Trí shraith céimeanna, is féidir L-sulforaphane a scaradh agus a ábhar a bhrath. Tá na buntáistí a bhaineann le simplíocht, íogaireacht ard, agus torthaí cruinne ag an modh, agus úsáidtear é go coitianta i bhrath L-sulforaphane i mbia, i gcosmaidí agus i gcógaisíocht.
Achoimre: Le forbairt na heolaíochta agus na teicneolaíochta, tá an modh chun aigéad L-thioglutamic a shintéisiú á uasmhéadú agus á fheabhsú go leanúnach. Ag an am céanna, tá a gcuid buntáistí agus míbhuntáistí féin ag an modh coipeadh bitheolaíoch agus an modh sintéise ceimiceach, agus braitheann an modh atá le húsáid ar an staid iarbhír.