IPTGName, CAS 367-93-1, struchtúr ceimiceach comhdhéanta de isopropil - Tá sé comhdhéanta de ghrúpaí D-thiogalactosid agus fosfáit. Ina measc, - Is analóg de galactose é D-thiogalactosid, ina bhfuil an adamh sulfair ionad an adamh ocsaigine. Ligeann an struchtúr speisialta glycóisíde seo do IPTG ceangal a dhéanamh de DNA agus léiriú géine a aslú. Tá tuaslagthacht íseal in uisce ag IPTG, ach is féidir é a thuaslagadh go maith i maolán fiseolaíoch saline agus fosfáit. Tá sé aigéadach le luach pKa de 4.5, a bhaineann leis an ngrúpa fosfáit ina struchtúr móilíneach. Níl sé éasca criostalú in uisce íon, ach féadann sé criostail a fhoirmiú i réitigh ard-tiúchana nó nuair a chuirtear comhdhúile eile leis. Mar gheall ar a chumas léiriú próitéine baictéarach a aslú, tá IPTG íogair do mhiocrorgánaigh áirithe. Mar shampla, d'fhéadfadh roinnt baictéir stop a chur ag fás nó bás tar éis nochtadh do IPTG.
(Nasc Táirge 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-reagent-cas-367-93-1.html ）
(Nasc Táirge 1: https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-powder-cas-367-93-1.html ）
Is modh é sintéis einsímeach IPTG a úsáideann einsímí chun imoibriú galactós agus trífhosfáit fualáin a chatalú chun grúpaí iseapróipile a tháirgeadh- - Modh le haghaidh D-thiogalactosid. Seo a leanas céimeanna mionsonraithe agus cothromóidí ceimiceacha an mhodha seo:
1. Obair ullmhúcháin:
Ullmhaigh na himoibrithe agus an trealamh is gá, lena n-áirítear galactós, triphosphate urdine, einsímí, maolán, coimeádáin imoibrithe, rialtóirí teochta, etc.
Cuir galactós agus triphosphate fualán i gcion áirithe leis an soitheach imoibriúcháin.
Cuir méid cuí einsím agus maolán isteach chun cobhsaíocht pH an chórais imoibrithe a choinneáil.
Cuir an coimeádán imoibrithe sa rialtóir teochta agus socraigh an teocht imoibrithe cuí.
2. Próiseas imoibrithe
2.1 Measc an córas imoibrithe go cothrom ag teocht chuí.
2.2 Coinnigh cobhsaíocht teochta agus pH an chórais imoibrithe agus leanúint ar aghaidh ag corraigh.
2.3 Sampláil agus tástáil iseatróipile ag eatraimh rialta- - Táirgeadh D-thiogalactosid.
2.4 Coigeartaigh an dáileog einsímeach agus an t-am imoibrithe bunaithe ar thorthaí na tástála chun an táirgeadh is fearr de ghrúpa isopropil- - D-thiogalactosíde a fháil.
3. Cothromóid cheimiceach
C20H31N3O12 + C3H7ClNName2O2S + UDP → C8H6Br4O2 + C10H15N5O10P2 + C3H7N
Ina measc, seasann ATP adenosine triphosphate, is ionann UDP agus diphosphate fualán, agus is ionann Pi agus fosfar neamhorgánach. Léiríonn an chothromóid cheimiceach seo foirmiú grúpaí isopropil ó ghalachtós agus trífhosfáit úráin faoi ghníomhaíocht einsímí- - D-thiogalactosid agus ADP, chomh maith le Pi.
4. Scaradh agus íonú
Tar éis an t-imoibriú a bheith críochnaithe, déantar an tuaslagán imoibrithe a scagadh nó a lártheifneoiriú chun galactós neamh-imoibrithe, triphosphate fualán, agus neamhíonachtaí eile a bhaint.
Úsáid a bhaint as teicníochtaí cuí deighilte agus íonúcháin, amhail malartú ian, crómatagrafaíocht, etc., chun isopropil- - D-thiogalactosid a íonú tuilleadh.
Déan tástáil cáilíochta, mar shampla crómatagrafaíocht leacht ardfheidhmíochta, mais-speictriméadracht, etc., chun a chinntiú go gcomhlíonann cáilíocht an táirge na ceanglais.
5. Achoimre
Tá ard-roghnaíocht, toradh agus íonacht ag modh sintéise einsímeach IPTG, chomh maith le cairdiúlacht don chomhshaol agus sábháilteacht ard. Sa mhodh seo, tá tionchar mór ag cineál, tiúchan, luach pH, teocht agus coinníollacha eile an einsím ar thorthaí an imoibrithe, agus tá gá le rialú agus coigeartú beacht. Ina theannta sin, tá na céimeanna deighilte agus íonúcháin ríthábhachtach freisin chun cáilíocht agus íonacht an táirge a chinntiú. I bhfeidhmiú praiticiúil, ba cheart coigeartuithe agus barrfheabhsuithe a dhéanamh de réir imthosca sonracha chun an grúpa iseapróipile is fearr- - Táirgeadh agus cáilíocht D-thiogalactosid a fháil.
Is imoibriú é an modh imoibrithe il-chomhpháirte de IPTG a úsáideann rannpháirtíocht il-chomhpháirteanna chun Modh iseapróipile- - le haghaidh D-thiogalactosid a shintéisiú. Seo a leanas céimeanna mionsonraithe agus cothromóidí ceimiceacha an mhodha seo:
1. Obair ullmhúcháin
Ullmhaigh na himoibrithe agus an trealamh is gá, lena n-áirítear galactós, triphosphate urdine, triphosphate adenosine, tiasulfáit sóidiam, einsímí, maolán, coimeádáin imoibrithe, rialtóirí teochta, etc.
Cuir galactós, triphosphate urdine, triphosphate adenosine, agus tiasulfáit sóidiam i cion áirithe leis an soitheach imoibriúcháin.
Cuir méid cuí einsím agus maolán isteach chun cobhsaíocht pH an chórais imoibrithe a choinneáil.
Cuir an coimeádán imoibrithe sa rialtóir teochta agus socraigh an teocht imoibrithe cuí.
2. Próiseas imoibrithe
2.1 Measc an córas imoibrithe go cothrom ag teocht chuí.
2.2 Coinnigh cobhsaíocht teochta agus pH an chórais imoibrithe agus leanúint ar aghaidh ag corraigh.
Le linn an phróisis imoibrithe, ba cheart aird a thabhairt ar dhul chun cinn an imoibrithe a bhreathnú, méid na heinsíme agus an t-am imoibrithe a choigeartú go tráthúil chun an grúpa isopropil is fearr- - táirgeadh D-thiogalactosid a fháil.
3. Cothromóid cheimiceach
C20H31N3O12 + C3H7ClNName2O2S + C9H14N2O12P2 + C10H15N5O10P2 → C8H6Br4O2 + C3H7N
Ina measc, is ionann ATP agus adenosine triphosphate, UDP ionann diphosphate uridine, ADP ionann diphosphate adenosine, agus Pi ionadaíocht fosfar neamhorgánach. Léiríonn an chothromóid cheimiceach seo foirmiú na ngrúpaí iseapróipile ó ghalachtós, trífhosfáit úráin, agus trífhosfáit adenosine faoi ghníomhaíocht einsímí- - D-thiogalactosid agus Pi.
4. Scaradh agus íonú
Tar éis an t-imoibriú a bheith críochnaithe, déantar an tuaslagán imoibrithe a scagadh nó a lártheifneoiriú chun galactós neamh-imoibrithe, triphosphate fualán, triphosphate adenosine, agus neamhíonachtaí eile a bhaint.
Úsáid a bhaint as teicníochtaí cuí deighilte agus íonúcháin, amhail malartú ian, crómatagrafaíocht, etc., chun isopropil- - D-thiogalactosid a íonú tuilleadh.
Déan tástáil cáilíochta, mar shampla crómatagrafaíocht leacht ardfheidhmíochta, mais-speictriméadracht, etc., chun a chinntiú go gcomhlíonann cáilíocht an táirge na ceanglais.
5. Achoimre
Úsáideann modh imoibrithe il-chomhpháirt IPTG na buntáistí a bhaineann le comhpháirteanna iomadúla a ghlacann páirt san imoibriú le chéile, le roghnaíocht ard, toradh agus íonacht. Sa mhodh seo, i dteannta leis na príomh-amhábhair cosúil le galactós, triphosphate urdine, agus einsímí, cuirtear comhpháirteanna cúnta cosúil le triphosphate adenosine agus tiasulfáit sóidiam freisin chun an t-imoibriú a chur chun cinn agus feabhas a chur ar chaighdeán an táirge. Ina theannta sin, tá na céimeanna deighilte agus íonúcháin ríthábhachtach freisin chun cáilíocht agus íonacht an táirge a chinntiú. I bhfeidhmiú praiticiúil, ba cheart coigeartuithe agus barrfheabhsuithe a dhéanamh de réir imthosca sonracha chun an grúpa iseapróipile is fearr a fháil- - Táirgeadh agus cáilíocht D-thiogalactosid. Ag an am céanna, ba cheart aird a thabhairt ar choinníollacha imoibrithe a rialú ar nós teocht, luach pH, agus dáileog einsímeach chun an éifeacht imoibrithe is fearr a bhaint amach.