Sephadex LH-20 CAS 9041-37-6

Foirm agus Struchtúr:
Is glóthach feirbthe é glóthach Sephadex a bhfuil struchtúr líonra tríthoiseach aige. Ligeann an struchtúr seo don fhoirmiú dextran at go hiomlán i dtuaslagáin uisce agus leictrilít, ag cruthú ciseal glóthach cobhsaí. Tá gráinneacht glóthach dextran difriúil freisin. Úsáidtear glóthach dextran ultrafine le haghaidh crómatagrafaíocht colún agus crómatagrafaíocht chiseal tanaí a éilíonn réiteach an-ard, agus úsáidtear glóthach garbh agus meánach le haghaidh crómatagrafaíocht ullmhúcháin, a fhéadfaidh ráta ard sreafa a bhaint amach faoi bhrú íseal.

Cumas at:
Tá líon mór grúpaí hiodrocsaile sa fhoirmiú dextran, rud a chuireann ar chumas an fhoirmiú at go hiomlán i réitigh uisce agus leictrilít. Is maoin fhisiceach thábhachtach de fhoirmiú dextran é céim swelling, a chinneann éifeacht scaradh glóthach agus dlús pacála colún crómatagrafaíochta. Tá céimeanna trasnasctha difriúla ag glóthach dextran cineál G, mar sin tá a gcéimeanna at agus a raonta deighilte difriúil. Go bunúsach níl tionchar ag láithreacht salainn agus glantach ar an gcéim swelling, rud a chuireann ar chumas an fhoirmiú dextran éifeacht scaradh cobhsaí a choinneáil faoi choinníollacha turgnamhacha éagsúla.

Cobhsaíocht:

Méid na gcáithníní agus raon deighilte:
Tá tionchar tábhachtach ag granularity glóthach dextran ar a éifeacht scaradh. Tá glóthach le méideanna cáithníní éagsúla oiriúnach do riachtanais scaradh éagsúla. Tá glóthach dextran ultra-fíneáil oiriúnach do chromatagrafaíocht colún agus crómatagrafaíocht chiseal tanaí a éilíonn réiteach an-ard, agus tá glóthach garbh agus meánach oiriúnach do chromatagrafaíocht ullmhúcháin. Ina theannta sin, athraíonn an raon deighilte glóthach dextran de réir a chéim trasnasctha. Mar shampla, tá raon scaradh glóthach dextran G-10 níos lú ná 700, atá oiriúnach chun substaintí móilíneacha beaga a scaradh; Tá raon deighilte de 5000-600000 ag an glóthach sephadex G-200, atá oiriúnach chun substaintí macromóilíneacha a scaradh agus a íonú.

Suiteáil colún agus cothromaíocht:
Ní mór an glóthach dextran a réamhchóireáil roimh úsáid, lena n-áirítear swelling agus luchtú colún. Is éard atá i gceist le swell ná glóthach tirim a thumadh in uisce driogtha ar feadh 24 uair an chloig ar a laghad, agus coinnigh ag corraigh chun a chinntiú go bhfuil an glóthach ag dul go hiomlán. Agus an colún á shuiteáil, cuir an glóthach swollen isteach sa cholún ag aon am amháin de réir na gceanglas suiteála colún, tabhair aird ar shuiteáil an cholúin fliuch a chothabháil, agus boilgeoga nó lochtanna sa cholún a sheachaint. Tar éis suiteáil colún, tá gá le cóireáil cothromaíochta, rud a bhaineann le húsáid réiteach maolánach ón gcolún uachtarach chun 3-5 toirte colún den cholún crómatagrafaíochta a chothromú go dtí go dtiocfaidh bunlíne an taifeadta cobhsaí. Is é cuspóir an chomhardú ná an colún glóthach a bhaint amach ar staid chobhsaí agus an éifeacht idirscartha a chinntiú.

Éifeacht idirscartha agus méid an tsampla:
Tá dlúthbhaint ag éifeacht scaradh glóthach dextran lena mhéid luchtaithe. Is féidir le méid samplach iomarcach nó neamhleor difear a dhéanamh ar an éifeachtúlacht idirscartha. Go ginearálta, níl an méid luchtaithe sampla de scagachán glóthach de ghnáth níos mó ná 5% de thoirt an leaba colún. Maidir leis an luchtú sampla tosaigh, moltar an méid leaba a rialú ag 1-2%, ar féidir a choigeartú ag brath ar an staid scaradh. Is féidir leis an méid sampla le linn díshalannaithe 20% de thoirt an leaba colún a bhaint amach. Ina theannta sin, tá baint ag roghnú airde an cholúin le riachtanais scaradh freisin. Má tá airde an cholúin ró-ard, cuirfidh an ciseal glóthach brú ar ais níos mó agus beidh tionchar aige ar an éifeacht scaradh. Dá bhrí sin, nuair a bhíonn airde colún á roghnú, ba cheart é a chinneadh bunaithe ar mheáchan móilíneach na substainte scartha agus na ceanglais idirscartha.

Modh elution agus cóireáil athghiniúna:
Tá go leor modhanna elution le haghaidh glóthach dextran, lena n-áirítear elution saor ó sháile, maolú maolánach agus elution grádán. Tá elution saor ó shalainn oiriúnach chun substaintí móilíní beaga a scaradh; Tá elution maolánach oiriúnach chun substaintí móra móilíneacha a scaradh agus a íonú. Is é elution grádán an próiseas chun substaintí grádán mar NaCl a chur leis an maolán colún uachtarach, agus substaintí de mheáchain mhóilíneacha éagsúla a scaradh trí neart ian an eluent a athrú. Tar éis tréimhse úsáide, is gá an glóthach dextran a athghiniúint chun na próitéiní iarmharacha réamhtheáite agus stubborn sa leaba colún a bhaint. I measc na modhanna cóireála athghiniúna tá sruthlú droim ar ais arís agus arís eile le huisce agus cothromaíocht le tuaslagán maolánach. Le haghaidh glóthach caomhnaithe fadtéarmach, tá gá le níocháin, díhiodráitiú agus triomú freisin.

Tréimhse bailíochta agus coinníollacha stórála:
Athraíonn tréimhse bailíochta glóthach dextran de réir a mhúnla agus coinníollacha stórála. Go ginearálta, athraíonn tréimhse bailíochta glóthach dextran ó roinnt míonna go bliain. Laistigh den tréimhse bailíochta, ba cheart glóthach a stóráil in áit thirim, fionnuar agus dorcha. Is féidir glóthach neamhúsáidte a stóráil ag teocht an tseomra; Tar éis é a úsáid, ní mór an glóthach a chóireáil i gceart roimh stóráil. Maidir leis an glóthach a stóráiltear ar feadh tamaill ghearr, is féidir é a nite glan agus a scagadh tirim, a chur leis le méid cuí leasaitheach (cosúil le 0.02% aigéad sóidiam) nó sáithithe in eatánól 20% chun fás miocróbach a rialú. Le haghaidh glóthach leasaithe fadtéarmach, ní mór é a thógáil amach as an gcolún, é a ní, a dhíhiodráitiú, a thriomú agus a chur i mbuidéil le haghaidh stórála.