Imoibrí IPTG CAS 367-93-1

Imoibrí IPTGdírímid ar theicneolaíocht na sintéise orgánach ó 2008, Is féidir linn táirgí ardchaighdeáin a fhorbairt, ag brath go hiomlán ar ár bhfoireann T & F fíorálainn. IPTG, CAS 367-93-1, struchtúr ceimiceach comhdhéanta d'iseapróipil - Tá sé comhdhéanta de ghrúpaí D-thiogalactosid agus fosfáit. Ina measc, - Is analóg de galactose é D-thiogalactosid, ina bhfuil an adamh sulfair ionad an adamh ocsaigine. Ligeann an struchtúr speisialta glycóisíde seo do IPTG ceangal a dhéanamh de DNA agus léiriú géine a aslú. Tá tuaslagthacht íseal in uisce ag IPTG, ach is féidir é a thuaslagadh go maith i maolán fiseolaíoch saline agus fosfáit. Tá sé aigéadach le luach pKa de 4.5, a bhaineann leis an ngrúpa fosfáit ina struchtúr móilíneach. Níl sé éasca criostalú in uisce íon, ach féadann sé criostail a fhoirmiú i réitigh ard-tiúchana nó nuair a chuirtear comhdhúile eile leis. Mar gheall ar a chumas léiriú próitéine baictéarach a aslú, tá IPTG íogair do mhiocrorgánaigh áirithe.

Ní dhéanaimid aon náire ar an Cheimic Mhór! Ná muinín an praghas míréasúnta, le do thoil i gcomparáid leis an bpraghas ar an leibhéal céanna cáilíochta.

An modh biosintéise deImoibrí IPTGgo hiondúil úsáideann sé gníomh catalaíoch miocrorgánach nó einsímí chun galactós a thiontú ina ghrúpa isopropil- - D-thiogalactosid.

Galactós mar amhábhar

Ar an gcéad dul síos, is gá galactós a úsáid mar amhábhar. Is siúcra cúig charbóin é galactós atá i láthair go forleathan sa nádúr agus is féidir é a fháil i bhfoirm síoróip nó criostail. I mbithshintéis, tiontaítear galachtós go iseapróipile trí shraith imoibrithe einsímeacha- - D-thiogalactosid.

Cultúr Miocróbach agus Metabolism Réaltrach

Ansin, is gá miocrorgánaigh chuí a roghnú mar chatalaíoch, a chuimsíonn baictéir, giosta agus múnlaí de ghnáth. Déan na miocrorgánaigh seo a shaothrú i meán cultúir chun ligean dóibh fás agus atáirgeadh faoi choinníollacha oiriúnacha. Idir an dá linn, déantar galactós, mar chothaitheach, a ithe ag miocrorgánaigh agus a mheitibiliú isteach sa idirmheánach atá ag teastáil trí shraith imoibrithe einsímeacha. Athraíonn an mheicníocht imoibrithe sonrach agus an chothromóid cheimiceach sa chéim seo ag brath ar na cineálacha miocrorgánaigh agus coinníollacha saothraithe.

Gineann imoibriú isiméiriúcháin grúpa isopropil- - D-Thiogalactosid-5 '- eistear fosfáite

Faoi ghníomhaíocht na n-einsímí arna dtáirgeadh ag miocrorgánaigh, téann táirgí idirmheánacha faoi imoibriú isiméirithe, ag giniúint grúpaí iseapróipile- - D-thiogalactosid-5 '- eistear fosfáite. Is é meicníocht imoibrithe na céime seo ná an grúpa hiodrocsaile galactós a aistriú go trífhosfáit fualáin, ag giniúint grúpa isopropil- - D-thiogalactosid-5 '- fosfáit agus défhosfáit fualáin. Seo a leanas an chothromóid shonrach cheimiceach:

(CH₂Ó)₂CHOH-OH + C₃H₇ClN₂O₂S + UDP → (CH₂Ó)₂CHOH-O-P(U) + C₁₀H₁₅N₅O₁₀P₂ + C₃H₇N

Gineann grúpa díchosanta grúpa isopropil- - D-thiogalactosid

Is í an chéim dheireanach ná an grúpa cosanta a bhaint den ghrúpa iseapróipile - - Tiontú eistear fosfáite D-thiogalactosyl-5 '- go dtí an táirge iseatróipil- - D-thiogalactosyl D-thiogalactosyl. Éilíonn an chéim seo de ghnáth úsáid a bhaint as tuaslagán aigéad nó alcaile mar chatalaíoch chun an t-imoibriú a chur chun cinn. Seo a leanas an chothromóid shonrach cheimiceach:

(CH₂Ó)₂CHOH-O-P(U) + H₂Ó → (CH₂Ó)₂CHOH-OH + P (i)

Scaradh agus íonú

Trí úsáid a bhaint as teicníochtaí deighilte agus íonúcháin amhail eastóscadh, asaithe, crómatagrafaíocht, etc., déantar an t-iseapróipil táirge sprice a bhaint as an meascán imoibriúcháin. Is é cuspóir an chéim seo ná neamhíonachtaí a bhaint agus íonacht an táirge a fheabhsú chun freastal ar riachtanais na n-iarratas praiticiúla

Imoibrí IPTGIsopropil- -D-thiogalactoside, ainm Béarla IPTG. Mar ionduchtóir phlaicéabó, is substráit chróigineach é X-gal, a úsáidtear an dá cheann le haghaidh scagadh bán. D’fhéadfadh IPTG an teascán DNA de lac operon de veicteoir Chemicalbook a aslú chun an blúire aimín de -galactosidase a shintéisiú, rud a d’fhéadfadh comhlánú intragenach ( comhlánú ) a bhaint amach leis an -galactosidase lochtach atá ionchódaithe ag cealla óstaigh.

1. Ullmhúchán bithábhar:

Is féidir IPTG a úsáid chun bithábhair áirithe a ullmhú, mar shampla polaisiúicrídí, liposomes, etc. Trí cheangal a dhéanamh le seicní cille nó próitéiní sonracha, is féidir le IPTG feidhmeanna fiseolaíocha sonracha cealla nó fíocháin a chur chun cinn, ag soláthar uirlisí taighde nua agus straitéisí teiripeacha do réimse na hinnealtóireachta bithleighis. Mar shampla, trí úsáid a bhaint as IPTG mar ionduchtóir, is féidir leis léiriú agus secretion spriocphróitéiní a chur chun cinn i mbaictéir innealtóireachta nó i gcealla giosta, ar féidir iad a úsáid chun bithábhair a tháirgeadh le feidhmeanna sonracha.

 

Féadfaidh na bithábhair seo polaisiúicrídí, liposomes, coimpléisc próitéine, etc.
Sa phróiseas ullmhúcháin bithábhair, is féidir le húsáid IPTG an próiseas táirgthe a shimpliú, éifeachtúlacht táirgthe a fheabhsú, agus costais táirgthe a laghdú. Ag an am céanna, is féidir rialáil bheacht ar spriocleibhéil léirithe próitéine agus airíonna bithábhar a bhaint amach trí mhéid agus fad an bhreisithe IPTG a rialú.

2. Scagadh drugaí:

 

Úsáidtear IPTG go príomha i scagthástáil drugaí chun léiriú spriocghéin a spreagadh agus chun táirgí slonn na spriocghéin a scagadh. Go sonrach, is féidir le IPTG fónamh mar ionduchtaitheoir d’operain lachtós trí cheangal a dhéanamh ar lac|táirgí, is cúis le hathruithe comhfhoirmiúla ar lac|táirgí ar shiúl ó lacO, rud a ghníomhachtú trascríobh agus a bhaint amach léiriú ard ar an géine sprice. Le linn an phróisis scagthástála gorm-bán, déanann IPTG trasfhoirmeoirí gan plasmid athchuingreach a tharlú chun coilíneachtaí gorma a fhoirmiú i láthair substráit chróigineach X-gal.

Nuair a chuirtear isteach blúirí eachtracha, cailltear na blúirí peiptíde a eascraíonn as Cumas comhlántach: Ní féidir le hath-chomhcheangail trasfhoirmithe ina bhfuil plasmidí athchuingreach ach Escherichia coli bán a fhoirmiú ar mheán ionduchtaithe crómogenic. Tá ról tábhachtach ag an modh scagthástála drugaí seo bunaithe ar athruithe datha maidir le staidéar a dhéanamh ar phróitéiní a bhaineann le galair shonracha agus cuardach a dhéanamh ar spriocanna nua drugaí.

3. Taighde géiniteach:

 

Is minic a úsáidtear IPTG mar uirlis mhóilíneach i dtaighde géiniteach. Trí cheangal a dhéanamh ar sheicheamh géine ar leith, is féidir le IPTG leibhéal slonn na géine sin a rialáil, agus ar an gcaoi sin staidéar a dhéanamh ar a gcaidreamh le feinitíopaí nó galair ar leith.
I dtaighde géiniteach, úsáidtear IPTG go príomha mar ionduchtóir agus féadann sé insamhladh a dhéanamh ar éifeacht ionduchtaithe lachtós ar lachtós. Úsáidtear é de ghnáth chun léiriú géinte eisghineacha a spreagadh, go háirithe i mbitheolaíocht mhóilíneach agus i dtaighde innealtóireachta géiniteach.
Nuair a bhíonn IPTG á úsáid, ceanglaíonn sé díriú ar ghéinte in óstaigh slonn mar Escherichia coli. Tríd an spriocghéine a thógáil le tionscnóirí cuí agus eilimintí rialála isteach sa veicteoir slonn, féadann sé próitéiní a tháirgeadh i gcealla Escherichia coli. Tá an-tábhacht ag baint leis an éifeacht spreagtha seo chun staidéar a dhéanamh ar fheidhm ghéine, idirghníomhaíochtaí próitéine, agus chun drugaí agus bithábhair nua a fhorbairt.

Ina theannta sin, is féidir IPTG a úsáid freisin mar ionduchtóir i dturgnaimh criostalaithe próitéine chun criostalú próitéin a chur chun cinn. Is é a mheicníocht gníomhaíochta ná comhfhoirmiú próitéiní a athrú trí cheangal a dhéanamh ar réigiúin hidreafóbach i bpróitéiní, agus ar an gcaoi sin comhiomlánú agus criostalú idir móilíní próitéine a chur chun cinn.

Tá an próiseas comhiomlánaithe agus criostalaithe seo inchúlaithe, agus mar sin is féidir criostalú próitéine a tharlú trí IPTG a chur leis, nó is féidir criostail próitéine a thuaslagadh trí IPTG a bhaint.

4. Iarratas talmhaíochta:

 

In iarratais talmhaíochta,Imoibrí IPTGmar chineál nua bithóipse, tá éifeachtaí sonracha luibhicíde. Is féidir leis cur isteach ar ghnáth-mheitibileacht galactós i bplandaí, rud a chuireann isteach ar a ngnáthfhás. Tá an modh cur isteach seo níos íogaire do roinnt fiailí, agus mar sin is féidir úsáid a bhaint as IPTG fiailí a bhaint go héifeachtach gan dochar a dhéanamh do bharra. Dá bhrí sin, tá ionchais iarratais leathan ag IPTG in iarratais talmhaíochta.

Cur isteach féideartha ar rialachán léiriú géine

 

Ionduchtú neamh-sonrach

Tá sainiúlacht áirithe ag IPTG, mar ionduchtóir, ina ghníomh, ach d’fhéadfadh ionduchtú neamhshonrach tarlú i gcásanna áirithe. Ní hamháin go gcothaíonn IPTG léiriú na ngéinte sprice, ach féadfaidh sé cur isteach freisin ar léiriú géinte eile laistigh de chealla. D'fhéadfadh sé seo a bheith mar gheall ar tar éis IPTG a cheangal leis an próitéin athbhrúiteora, go n-athraíonn sé comhfhoirmiú agus feidhm an phróitéin athbhrúiteora, rud a fhágann go mbíonn éifeachtaí áirithe aige ar oibritheoirí eile, rud a mhaolú ar chosc ar léiriú géine neamh-sprioc.

Is féidir le hionduchtú neamh-shonrach a bheith ina chúis le hathruithe ar phróifílí léirithe próitéine intracellular, ag táirgeadh próitéiní gan choinne a chuireann isteach ní hamháin ar anailís agus breithiúnas torthaí turgnamhacha, ach d'fhéadfadh drochthionchar a bheith acu freisin ar ghnáthfheidhmeanna fiseolaíocha na gcealla. Mar shampla, i roinnt turgnaimh léiriú próitéine, tar éis ionduchtú le IPTG, chomh maith le méadú ar léiriú an phróitéin sprice a bhrath, fuarthas upregulation de léiriú roinnt próitéiní anaithnid eile freisin. D’fhéadfadh na próitéiní sainráite neamhshonracha seo cur isteach ar íonú agus staidéir fheidhmiúla na sprice próitéine.

Do-aisiompaithe ar Slonn Ionduchtaithe

Faoi imthosca gnáth, tar éis an t-ionduchtóir a bhaint, ba cheart go dtiocfadh léiriú géine ar ais go dtí a leibhéal réamh-ionduchtúcháin. Mar sin féin, léirigh staidéir go bhféadfadh méid áirithe do-aisiompaithe a bheith ag léiriú géine spreagtha IPTG. Nuair a úsáidtear IPTG chun léiriú géine a aslú, fiú má bhaintear an IPTG, féadfaidh an leibhéal slonn géine fós ag leibhéal ard agus ní féidir é a chur ar ais go dtí an leibhéal bunlíne roimh an ionduchtú.

D'fhéadfadh an do-aisiompaitheacht seo a bheith mar gheall ar-athruithe intracellular fadtéarmacha de bharr IPTG, mar athruithe ar struchtúr crómatin agus mionathruithe ar fhachtóirí trascríobh, a chothaíonn leibhéal ard gníomhaíochta trascríobh géine. Is féidir le do-aisiompaitheacht na slonn spreagtha a bheith ina chúis le deacrachtaí móra i dturgnaimh, go háirithe i dturgnaimh a éilíonn rialú beacht ar leibhéil slonn géine, a bhféadfadh torthaí turgnamhacha míchruinn agus neamh-in-atáirgthe a bheith mar thoradh orthu.

Bunaithe ar a struchtúr móilíneach cobhsaí agus ar ghníomhaíocht ionduchtaithe iontaofa, tá IPTG tar éis éirí ina imoibrí fíor-riachtanach i saotharlanna bitheolaíochta móilíneacha ar fud an domhain. Úsáidtear go forleathan é i léiriú próitéin athchuingreach, taighde ar fheidhm ghéine, agus turgnaimh innealtóireachta miocróbach, ag soláthar éifeachtaí cobhsaí ionduchtaithe do thaighde eolaíoch agus do tháirgeadh tionsclaíoch a bhunú. Cinntíonn ár bhfócas fadtéarmach ar theicneolaíocht sintéise orgánach agus dianrialú cáilíochta go gcoimeádann ár dtáirgí IPTG ardíonacht, cobhsaíocht agus comhsheasmhacht, ag freastal go héifeachtach ar riachtanais éilitheacha na dturgnamh eolaíochta agus na bhfeidhmchlár tionsclaíochta.

Le tacaíocht ó fhoireann ghairmiúil T&F, leanaimid ar aghaidh le próisis sintéise a bharrfheabhsú agus feidhmíocht táirgí a fheabhsú chun freastal níos fearr a dhéanamh ar thaighdeoirí agus ar mhonaróirí domhanda. Mar gheall ar a mheicníocht shoiléir gníomhaíochta, a airíonna cobhsaí, agus a infheidhmeacht leathan, fanfaidh IPTG mar phríomh-imoibrí i dtaighde eolaíochta beatha, agus leanfaimid ag soláthar táirgí ardchaighdeáin agus tacaíocht theicniúil ghairmiúil do chur chun cinn na biteicneolaíochta.

Clibeanna Te: imoibrí iptg cas 367-93-1, soláthraithe, monaróirí, monarcha, mórdhíola, ceannach, praghas, mórchóir, ar díol