Brómaphenol gormis púdar buí éadrom go donn é; Tá sé intuaslagtha go héasca i dtuaslagán hiodrocsaíde sóidiam, intuaslagtha i meatánól, eatánól agus beinséin, beagán intuaslagtha in uisce (thart ar {{0}}.4g/100ml), agus is é 422nm an tonnfhad uasta ionsúcháin. Is táscaire pH é. Sa raon pH 3.0~4.6, athraíonn an dath ó bhuí go gorm; Úsáidtear go coitianta é freisin mar lí táscaire electrophoretic. Tá an ráta imirce electrophoretic sa fhoirmiú thart ar mhóilíní beaga d'aigéad núicléasach nó próitéin. Agus staidéar á dhéanamh ar an idirghníomhaíocht idir haemaglóibin daonna agus haemaglóibin ainmhithe éagsúla (giorraithe mar idirghníomhaíocht), fuarthas amach go timpisteach gur féidir le gorm bromophenol (BPB) idirghníomhú freisin le haemaglóibin sicín sa phróiseas tras-leictreafóiréis, ach níl an feiniméan seo ann idir BPB agus daoine fásta. haemaglóibin. Tá BPB difriúil ó haemaglóibin. Is cumaisc íseal-mhóilíneach é. Féadfaidh a idirghníomhaíocht le haemaglóibin a bheith difriúil ón idirghníomhaíocht idir haemaglóibin i meicníocht.
Is iad seo a leanas samplaí de ghorm bromophenol a chur i bhfeidhm:
1. Ullmhaíodh membrane íogair ilchodach fótaiceimiceach le haghaidh aitheantais ian hidrigine. Is iad seo a leanas céimeanna an mhodha:
1) Ar dtús, déan 55g aicriolaimíde a dhíscaoileadh in 20-30ml uisce driogtha, é a scagadh, ansin an leacht scagtha a fhuarú go teocht an tseomra, ansin déan scagachán trí shúchán, fan go criostalóidh sé agus go tirim go nádúrtha, tirim i bhfolús é chun aicriolaimíd íon a fháil. ;
2) Tuaslaig 10g de aicriolaimíd íon, 0.04-0.05g persulfate amóiniam, 0.15-0.25g de N, N aicriolaimíd meitiléine, 0.01-0.012g de cresol violet agus 0.02-0.022g de bhrómaphenol gorm in uisce driogtha, díocsaídiú le nítrigin agus de réir a chéile iad a théamh chun H móide polaiméir íogair ianafóir a fháil bunaithe ar violet cresol agus gorm brómaphenol;
3) Úsáidtear lártheifneoir ardluais chun an polaiméir a rothlú chun scannán íogair ilchodach fótaiceimiceach a fhoirmiú. Tá próiseas simplí, ísealchostas agus luas freagartha maith, tréithe teochta agus atrialltacht an scannáin íogair ullmhaithe ag an aireagán. Féadann sé an raon íogair d'ian hidrigine a leathnú go héifeachtach, agus is féidir é a úsáid chun an chuid íogair d'aitheantas braiteoir fótachemical ian hidrigine a mhonarú.
2. Ullmhaítear púdar próitéin cumaisc le feidhm forlíonta cailciam, a chuimsíonn na hamhábhair agus na codáin meáchain seo a leanas: cuntais císte almond ar 30-40 faoin gcéad den mhais iomlán; Is ionann aicéatón agus 1.5 ~ 2.5 faoin gcéad den mhais iomlán; Is é an comhréir de thuaslagán décharbónáite sóidiam sa mhais iomlán ná 8-15 faoin gcéad ; Is ionann aigéad hidreaclórach agus 1.5~2.5 faoin gcéad den mhais iomlán; Brómaphenol gorm freagrach as 1.5~2.5 faoin gcéad den mhais iomlán; Ba é an cion de vitimín D sa mhais iomlán ná 12-18 faoin gcéad ; Is ionann glúcónáit chailciam agus 15-20 faoin gcéad den mhais iomlán; Is ionann eatánól agus 1.5~2.5 faoin gcéad den mhais iomlán agus is ionann uisce driogtha agus 15-20 faoin gcéad den mhais iomlán. Úsáideann an t-aireagán císte almond mar amhábhar, sleachta le aicéatón agus eatánól, scagairí agus dries chun púdar próitéin a ullmhú, agus úsáideann gluconate cailciam mar fhorlíonadh cailciam. Ní hamháin go bhfeabhsaíonn an púdar próitéin cumaisc a tháirgtear trí úsáid a bhaint as an modh seo an caighdeán céadfach go soiléir, ach is féidir leis an éifeacht úsáide a fheabhsú go mór freisin nuair a úsáidtear é i gcomhcheangal le próitéin agus gluconate cailciam, atá oiriúnach do dhaoine lár-aois agus scothaosta le easnamh cailciam.
3. Ullmhaigh trealamh chun éifeachtúlacht sulfonylureas a thuar, ina mbeidh na comhpháirteanna seo a leanas:
(1) Lysate cille fola dearga;
(2) Leukocyte lysate;
(3) Tuaslagán deascadh próitéine;
(4) Tuaslagán stórála aigéid núicléacha;
(5) meascán imoibrithe PCR (ina bhfuil MgCl2, dNTP, primer aimplithe PCR agus caighdeán inmheánach);
(6) DNA polymerase;
(7) Rialú cáilíochta dearfach;
(8) Rialú diúltach;
(9) Córas maoláin endonuclease;
(10) Srian endonuclease;
(11) uisce PCR;
(12)10 × Maolán lódála samplach le haghaidh leictreafóiréis: 0.25 faoin gcéad brómaphenol gorm, 40 faoin gcéad (w/v) tuaslagán uiscí de shiúcrós. Ar an modh seo, baineadh DNA genomic as samplaí bitheolaíocha, agus aimsíodh polymorphism géine receptor sulfonylurea i samplaí bitheolaíocha aonair trí anailís polymorphism blúire srianta imoibriú slabhra polymerase (PCR-RFLP) chun éifeachtúlacht drugaí sulfonylurea a thuar.
Brómaphenol sintéiseach gorm:
1. Feanól dearg a dhíscaoileadh in aigéad aicéiteach oighreach, cuir tuaslagán bróimín in aigéad aicéiteach oighreach faoi stirring, corraigh ar feadh cúpla nóiméad, é a dhoirteadh isteach in uisce te 60 céim, é a fhuarú go teocht an tseomra, agus é a chur thar oíche. Scag, nigh an císte scagaire le haigéad aicéiteach oighreach agus beinséin ar a seal, agus aer tirim chun brómaphenol gorm a fháil.
2. Feanól dearg a dhíscaoileadh in aigéad aicéiteach oighreach, é a théamh go fiuchphointe, titim réiteach bróimín tuaslagtha in aigéad aicéiteach oighreach, scagaire nuair a bhíonn soladach buí scartha, nigh bróimín saor in aisce le haigéad aicéiteach, agus é a thriomú san aer chun táirge amh a fháil. Úsáid aigéad aicéiteach oighreach nó aicéatón agus tuaslagóir measctha aigéad aicéiteach oighreach chun athchriostalú chun gorm brómaphenol íon a fháil.
3. Feanól dearg agus bróimín a thuaslagadh in aigéad aicéiteach chun tuaslagán a ullmhú. Gcéad dul síos, teas an tuaslagán aigéad aicéiteach dearg feanól go fiuchphointe, ansin cuir an tuaslagán aigéad aicéiteach bróimín go mall faoi stirring: nuair a bhíonn an t-imoibriú feanól dearg críochnaithe agus nach bhfuil na criostail buí scartha a thuilleadh, fionnuar agus scagaire. Tar éis an bróimín saor in aisce a ní sa chriostail le méid beag d'aigéad aicéiteach, déan é a athchriostalú le haigéad aicéiteach nó aigéad aicéiteach aicéatóin, agus é a thriomú san aer chun brómaphenol íon gorm a fháil.