GLP-1(nasc:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/glp-1-peptide-cas-87805-34-3.html) comhdhéanta de dhá slabhra polaipeiptíde idirnasctha: slabhra peptide le 21 iarmhar aimínaigéad ag an N-terminus (GLP{2}}[7-27]), agus slabhra peiptíde le 30 iarmhar aimínaigéad ag an C- foirceann (GLP-1 [28-58]), tá droichead comhdhlúthúcháin idir na slabhraí. Is í an fhoirmle cheimiceach de GLP-1 ná C165H264N50O55S2, tá an mhais molar thart ar 3.8 kDa, agus an CAS 87805-34-3. Athraíonn staid luchta GLP-1 le pH. Nuair a bhíonn an pH níos ísle ná an pointe isleictreach GLP-1, déantar GLP-1 a luchtú go deimhneach; nuair is mó an pH ná an pointe isleictreach, gearrtar GLP-1 go diúltach. Faoi choinníollacha fiseolaíocha, gearrtar GLP-1 go diúltach de ghnáth. Tá íogaireacht redox láidir agus íogaireacht protease. Faoi choinníollacha fiseolaíocha, is minic go ndéantar GLP-1 a hidrealú go tapa ag próitéisí mar trypsin, rud a chaillfidh a ghníomhaíocht bhitheolaíoch. Ina theannta sin, beidh tionchar ag fuinneamh teirmeach, pH, iain mhiotail agus fachtóirí eile ar chobhsaíocht GLP-1. Chun cobhsaíocht GLP a fheabhsú, úsáideann taighdeoirí modhanna éagsúla chun é a fheabhsú, mar shampla modhnú ceimiceach agus coigeartú struchtúir mhóilíneach.
Pointe iseleictreach:
Is hormón polaipíde é GLP{0}} a bhfuil pointe isleictreach (pI) de thart ar 5.1 ann. Is é an pointe isleictreach an luach pH ag a bhfuil líon comhionann ian deimhneach agus diúltach i dtuaslagán áirithe. Nuair a bhíonn substaint ag a pointe isleictreach, níl aon mhuirear glan aige, mar sin ní bheidh sé faoi réir fórsaí leictreafóiréiseacha i réimse leictreach, agus mar sin ní bhogfaidh sé go dtí an dá cuaille.
Ós rud é go bhfuil pointe isleictreach GLP-1 níos ísle ná luach pH na timpeallachta fiseolaíocha, déanfar é a luchtú go dearfach in vivo. Ligeann airíonna den sórt sin do GLP-1 dul tríd an chillscannán go tapa trí roinnt iompróirí móilíneacha, mar receptor GLP-1 (GLP-1R), agus ceangal le GLP-1R sa chill, rud a fheidhmíonn a feidhmeanna fiseolaíocha éagsúla. Tá pointe isleictreach GLP-1 thart ar 5.9, is é sin, nuair a bhíonn sé ag pH=5.9, is é líon luchtaithe an mhóilín peiptíde GLP-1 a bhfuil glanlucht aige ná nialas. Ciallaíonn sé seo, faoi choinníollacha pH éagsúla, go n-athrófar staid luchtaithe GLP-1 freisin, rud a chuirfidh isteach ar a ghníomhaíocht bhitheolaíoch san orgánach.
Chomh maith leis an bpointe isoelectric, tá airíonna fisiceacha agus ceimiceacha agus tréithe struchtúracha eile ag GLP{0}}, mar shampla meáchan móilíneach, seicheamh aimínaigéad, cumraíocht spásúil, hidreafhileacht, tuaslagthacht, etc. Tá tábhacht mhór ag baint leo maidir le hoibriú agus feidhm GLP-1 in vivo, agus is gnéithe tábhachtacha iad freisin maidir le taighde agus feidhmiú GLP-1.
muirear:
Is hormón polaipíde é GLP{0}}. Tá dhá iarmhar aimínaigéad nádúrtha, cistéin agus leucine ina struchtúr móilíneach. Is féidir leis na hiarmhair seo dul faoi imoibrithe ocsaídiúcháin chun bannaí déshilfíde (bannaí SS) a fhoirmiú faoi choinníollacha sonracha. Dá bhrí sin tionchar ar airíonna lucht GLP-1.
I dtimpeallacht fiseolaíoch, taispeánann GLP-1 airí a bhfuil luchtaithe deimhneach aige. Tá sé seo toisc go bhfuil a phointe isoelectric thart ar 5.1, atá níos ísle ná an timpeallacht fiseolaíoch le luach pH de 7.4, rud a fhágann go bhfuil an grúpa amine ag a N-críochfort prótónáitithe go páirteach. déan an móilín iomlán a luchtú go dearfach. Sa chás seo, is féidir le GLP-1 dul isteach go tapa agus comhcheangal le GLP-1R sa chill trí roinnt iompróirí, ar nós gabhdóir GLP-1 (GLP-1R), agus imirt ar éagsúlacht na feidhmeanna fiseolaíocha. Athraíonn staid luchta GLP-1 le pH. Nuair a bhíonn an pH níos ísle ná an pointe isleictreach GLP-1, tá GLP-1 luchtaithe go deimhneach; nuair is mó an pH ná an pointe isleictreach, gearrtar GLP-1 go diúltach. Faoi choinníollacha fiseolaíocha, is gnách go ngearrtar GLP-1 diúltach.
I gcúinsí áirithe, áfach, is féidir banna SS GLP-1 a laghdú, rud a fhágann go gcaillfidh sé a lucht deimhneach agus go nglactar leis staid ghlan mhuirearaithe nó réadmhaoine atá luchtaithe go diúltach. Sa tsaotharlann, is féidir an t-imoibriú laghdaithe seo a chur chun cinn trí oibreán laghdaitheach ar nós DTT (aigéad dithiotreonic), rud a athróidh staid luchtaithe GLP-1.
Mar fhocal scoir, bíonn tionchar ag go leor fachtóirí ar staid luchta GLP-1, lena n-áirítear a phointe isleictreach, feidhmghrúpaí ceimiceacha sa mhóilín, agus coinníollacha seachtracha comhshaoil. Tá na tréithe agus na hairíonna seo an-suntasach maidir le feidhm agus ról GLP-1 in vivo, agus is príomhghnéithe iad maidir le taighde agus feidhmiú GLP-1.
cobhsaíocht:
Tá íogaireacht láidir um ocsaí agus íogaireacht próitéáis ag GLP-1. Faoi choinníollacha fiseolaíocha, is minic go ndéantar GLP-1 a hidrealú go tapa ag próitéisí mar trypsin, rud a fhágann go gcailltear a ghníomhaíocht bhitheolaíoch. Ina theannta sin, beidh tionchar ag fuinneamh teirmeach, pH, iain miotail agus fachtóirí eile ar chobhsaíocht GLP-1. D'fhonn cobhsaíocht GLP a fheabhsú-1, úsáideann taighdeoirí modhanna éagsúla chun é a fheabhsú, mar shampla modhnú ceimiceach agus coigeartú struchtúir mhóilíneach.
Am srutha:
Is hormón polaipíde é GLP{0}} (peptide cosúil le glúcagon-1) is féidir a bhrath agus a chainníochtú trí mhais-speictriméadracht. I dteicneolaíocht crómatagrafaíocht leachta-mhais-speictriméadrachta (LC-MS), tagraíonn an t-am sreafa de GLP-1 don am a thógann sé ar iain sileadh de bharr imbhuailtí sa réimse leictrigh agus an brathadóir a bhaint amach ar deireadh. Tagraíonn an t-am srutha don am a dtéann móilíní i dtuaslagán chun dul tríd an gcolún crómatagrafach, ar féidir leo méid, cruth agus staid luchtaithe na móilíní a léiriú. I gcás móilíní peiptíde ar nós GLP-1, is gnách go mbíonn an t-am sreafa gearr agus is féidir é a chríochnú laistigh de nóiméad.
Tá an t-am srutha ar cheann de na paraiméadair anailíse tábhachtacha i dteicneolaíocht mais-speictriméadrachta, ar féidir é a úsáid chun an difríocht idir comhdhúile éagsúla a aithint agus isiméirí a idirdhealú, etc. é agus peptídí nó neamhíonachtaí eile, agus a úsáidtear a thuilleadh le haghaidh anailís chainníochtúil.
Go ginearálta, i mais-speictriméadracht LC-MS, beidh tionchar ag an am sruth ag go leor fachtóirí, mar shampla an cineál mais-speictriméadar, modh ianúcháin, cineál gáis imbhuailte, voltas, teocht, etc. Ar bhonn sainaitheanta agus cainníochtaithe, is gá coinníollacha turgnamhacha a bharrfheabhsú agus a chaighdeánú chun torthaí in-atáirgthe a fháil.
Tagraíonn an t-am sreafa de GLP-1 don am a theastaíonn chun go sroichfidh na hiain an brathadóir de bharr an tsrutha sa réimse leictrigh, ar féidir é a úsáid mar pharaiméadar anailíse i dteicneolaíocht LC-MS chun peiptídí a aithint agus a chainníochtú a gcorp isiméirí etc.
Go hachomair, is móilín beag peiptíde é GLP-1 atá an-hidreifileach agus cobhsaí i dtimpeallachtaí fiseolaíocha, ach atá so-ghabhálach freisin d'íogaireacht redox agus íogaireacht próitéáis. Tá tábhacht mhór ag baint le tuiscint a fháil ar airíonna fisiceacha GLP-1 chun drugaí nua GLP a fhorbairt agus chun staidéar a dhéanamh ar a ngníomhaíochtaí bitheolaíocha.