Fada R3 IGF-I(nasc:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/long-r3-igf-i-cas-143045-27-6.html) is móilín polaipeiptíde sintéiseach é ar cuireadh tús lena stair fhionnachtana sna 1970idí. Ag an am sin, thosaigh taighdeoirí ag tabhairt aird ar an ról tábhachtach atá ag fachtóir fáis-I (IGF-I) cosúil le insulin endogenous maidir le fás agus meitibileacht a rialú, agus rinne siad iarracht struchtúr móilíneach cosúil le IGF-I a dhearadh ach níos bitheolaíocha agus cógaisíochta. Cineál nua de mhóilín peptide le luach iarratais.
1. Fionnachtain agus taighde IGF-I:
Go luath sna 1950idí, thosaigh taighdeoirí ag iniúchadh a dhéanamh ar fhachtóirí fáis cosúil le insulin a bheith ann agus a fheidhm. Sna 1960idí, d'aonraigh roinnt eagraíochtaí taighde cineál nua próitéine le iomadú cille agus gníomhaíocht chun fás a chur chun cinn ó serum ainmhithe, ar a dtugtar hormón fáis (GH). Níos déanaí, d'aimsigh taighdeoirí próitéin eile a bhaineann go dlúth le GH ó serum ainmhithe agus fíocháin eile, ar a dtugtar IGF-I.
Is próitéin mhóilíneach beag é IGF-I atá comhdhéanta de 70 iarmhar aimínaigéad, agus tá a struchtúr cosúil le insulin daonna. Déantar IGF-I a shintéisiú go príomha ag an ae, a bhaineann go dlúth le héifeachtaí fiseolaíocha GH, agus is féidir iomadú cille, idirdhealú agus meitibileacht a rialáil tríd an idirghníomhú idir a chuid gabhdóirí féin agus receptor fachtóir fáis cosúil le insulin (IGF-IR).
Sna 1970í, de réir mar a dhoimhnigh an taighde ar IGF-I, thosaigh taighdeoirí ag iniúchadh a struchtúr móilíneach agus a n-airíonna bitheolaíocha, agus rinne siad iarracht móilín analógach IGF-I níos luachmhaire a fhorbairt.
2. Fionnachtain agus taighde fada R3 IGF-I:
Ó dheireadh na 1970idí go dtí tús na 1980idí, thosaigh roinnt taighdeoirí ag modhnú an t-ord N-críochfort de IGF-I agus dhear siad analóg IGF-I le struchtúr móilíneach níos cobhsaí agus sintéis agus úsáid níos éasca. Ar an mbonn seo, rugadh fada R3 IGF-I.
Úsáideann Long R3 IGF-I arabinosyl-Ala-Pro-Ala (Apa) chun an t-ord Gln-Pro-Arg-Gly de IGF-I endogenous a chur in ionad, rud a fhágann go mbeidh leathré níos faide i bplasma, agus nach bhfuil faoi cheangal agus imréiteach go héasca ag Próitéin ceangailteach IGF (IGFBP). Ina theannta sin, rinneadh an R3 fada IGF-I a mhodhnú freisin trí 13 seicheamh aimínaigéad (lena n-áirítear Arg-Lys-Glu-Gly-Ser) a chur leis ag an gcríochfort C, ag tabhairt isteach bannaí disulfide agus -struchtúir-helical, etc., ionas go mbeidh sé tá gníomhaíocht bhitheolaíoch níos airde aige agus poitéinseal d'fheidhmiú cógaisíochta.
Le linn taighde agus forbairt fada R3 IGF-I, rinne roinnt taighdeoirí iarracht freisin a éifeachtúlacht léirithe agus costas táirgthe a fheabhsú trí theicneolaíocht transgenic agus modhanna eile. Mar shampla, cuireadh R3 IGF-I fada in iúl ag córais mhiocróbacha mar Escherichia coli agus giosta, agus íonaithe agus scartha le cóireáil aigéad, crómatagrafaíocht frithshrutha agus teicneolaíochtaí eile, agus ar deireadh fuarthas táirge fada R3 IGF-I ard-íonachta.
Le linn an phróisis fhada taighde, de réir struchtúr speisialta LONG R3 IGF-I, atá ina mhóilín polypeptide cosúil i struchtúr le IGF-I endogenous agus tá 13 aimínaigéad breise ann, rinneadh staidéar ar mhodhanna sintéiseacha éagsúla le haghaidh táirgeadh. Tá na modhanna seo a leanas den chuid is mó ag an bpróiseas ullmhúcháin de R3 IGF-I fada:
1. Modh sintéise ceimiceach:
Tá sintéis cheimiceach ar cheann de na modhanna is coitianta a úsáidtear chun R3 IGF-I fada a ullmhú. Rinneadh sintéis cheimiceach R3 IGF-I fada bunaithe ar an seicheamh aimínaigéad aitheanta de IGF-I, agus 13 seicheamh aimínaigéad breise curtha leis ag an gcríochfort N de R3 IGF-I fada. Éilíonn sintéis úsáid a bhaint as ilghrúpaí cosanta chun roghnaíocht aimínaigéad agus éifeachtúlacht imoibrithe a chinntiú. De ghnáth, déantar an deighleog peptíde cosanta den sprioc-aimínaigéad a ullmhú ar dtús trí shintéis soladach-chéim, agus ansin é a chur le chéile i móilín fada R3 IGF-I trí shintéis chéim leachtach.
2. An tAcht Biteicneolaíochta:
Úsáideann an modh biteicneolaíochta go príomha cealla innealta chun próitéiní athchuingreach a chur in iúl, agus cuireann sé LONG R3 IGF-I in iúl trí sheichimh ghéine agus veicteoirí cainte a athrú. Ar an modh seo, is féidir an ghéine LONG R3 IGF-I a thabhairt isteach sa chill óstach le cur in iúl trí theicneolaíocht athcheangail géine, veicteoir lentiviral, veicteoir plasmid agus a leithéidí. Is féidir leis an modh seo líon mór LONG R3 IGF-I a tháirgeadh, agus féadann sé freisin a éifeacht léirithe agus íonú a bharrfheabhsú trí athrú ar an seicheamh comhartha veicteoir agus secretion.
3. Modh einsímeach:
Úsáideann an modh einsímeach go príomha einsímí sonracha cosúil le pepsin agus einsím muscle clam chun an próitéin fhada réamhtheachtaithe R3 IGF-I a ghlanadh chun monaiméir LONG R3 IGF-I a fháil, agus seachtháirgí neamhriachtanach a sheachaint. Sa mhodh seo, is gá an maitrís ina bhfuil an próitéin réamhtheachtaithe fada R3 IGF-I a fháil ar dtús, agus ansin imoibriú ag teocht chuí trí einsímí agus rialú pH a chur leis, etc., chun an sprioc-substaint a fháil ar deireadh LONG R3 IGF-I.
4. Modh modhnú próitéin:
Úsáideann an modh modhnú próitéine go príomha an IGF-I endogenous sintéiseithe chun é a mhodhnú chun éifeacht R3 IGF-I fada a bhaint amach. Ar an modh seo, de ghnáth tugtar isteach críochfort N de IGF-I endogenous i 13 seicheamh ar leith chun go mbeidh éifeacht R3 IGF-I fada aige. Ina theannta sin, is féidir an ghníomhaíocht bhitheolaíoch agus leathré fada R3 IGF-I a fheabhsú tuilleadh trí ghrúpa C-críochfort a athrú.
Go hachomair, cuimsíonn modhanna sintéise fada R3 IGF-I sintéis cheimiceach, biteicneolaíocht, modhnú einsímeach agus próitéin, agus tá buntáistí, míbhuntáistí agus raon feidhme an iarratais ag gach modh. Le forbairt leanúnach na teicneolaíochta sintéise ceimiceach, teicneolaíocht innealtóireachta géiniteach agus réimsí eile, déanfar an teicneolaíocht ullmhúcháin fada R3 IGF-I a fheabhsú agus a fheabhsú tuilleadh.