Sephadex G75Is cineál filler scagaire glóthach é le feidhmíocht mhaith. Ullmhaítear é trí Dextran agus Epichlorohydrin a chrosghiniúint. Is glóthach múnlaithe bead é le cuid mhór de ghrúpaí hiodrocsaile, atá éasca le dul i dtuaslagáin uisce agus leictrilít. Is é 80000 an teorainn uasta eisiaimh den chomhdhúil seo, agus braitheann an chéim swelling shonrach ar mhéid na gcoinníollacha tirime agus na gcoinníollacha oibriúcháin. Mar shampla, faoi choinníollacha áirithe, d'fhéadfadh an méid atmaisféar tirim a bheith 519ml/g. Nuair a bhíonn an raon pH oibriúcháin 6.210 (5.210 do roinnt táirgí), is féidir leis an gcomhdhúil fanacht seasmhach. Moltar é a stóráil ag teocht an tseomra, fuarú, agus ar shiúl ó sholas sa raon teochta de 430 céim (nó 425 céim) chun a fheidhmíocht agus a chobhsaíocht a choinneáil. Tá an tsubstaint seo oiriúnach go háirithe do bhithmhóilíní móra a bhfuil meáchan móilíneach níos mó ná 80000 acu. Úsáidtear go príomha iad le haghaidh díshalannú agus athsholáthar maolánach na mbithmhóilíní móra sin. Trí oibríocht chéim amháin {{}}, is féidir é a dhí -chomhdú go tapa, truailleáin a bhaint, agus móilíní a aistriú chuig tuaslagán maolánach nua. Chomh maith le díshalannú agus athsholáthar maolánach, tá Sephadex G-75 oiriúnach freisin don phróiseas íonaithe bithmhóilíní móra.
 |
 |
Sephadex G75Is glóthach dextran é, a úsáidtear go príomha chun an teicneolaíocht idirscartha agus íonúcháin i mbithcheimic agus i mbitheolaíocht mhóilíneach. Seo a leanas príomhúsáidí na substainte seo:
Sa phróiseas díshalannú, is féidir leis salainn (salainn mhóilíneach beag neamhorgánacha de ghnáth) a bhaint go héifeachtach ó réitigh mhóilíneacha bhitheolaíocha. Is é an buntáiste a bhaineann leis an tsubstaint seo ná go bhfuil sé éasca oibriú, go tapa, agus gur féidir leis díshalannú éifeachtach a bhaint amach gan gníomhaíocht bithmhóilíní a athrú. Ina theannta sin, mar gheall ar a chobhsaíocht cheimiceach agus a bhith -chomhoiriúnacht den scoth, tá sé oiriúnach do chóireáil díshalannú bithmhóilíní éagsúla, lena n -áirítear próitéiní, peiptídí, aigéid núicléasacha, etc. I bhfeidhmithe praiticiúla, is iondúil go ndéantar díshabhainiú glóthach a chomhcheangal le teicneolaíochtaí íonúcháin eile amhail malartú ian, crómatagrafaíocht cleamhnaithe, etc., chun íonú cuimsitheach de scaradh.
Tá raon leathan feidhmchlár ag an tsubstaint seo in athsholáthar maolánach, go háirithe i réimsí na bithcheimice agus na bitheolaíochta móilíneach. Mar shampla, sa phróiseas íonaithe próitéine, is gá uaireanta próitéiní a aistriú ó chóras maolánach amháin go córas maolánach eile atá níos oiriúnaí dá gcobhsaíocht agus dá ngníomhaíocht. Agus is féidir leis an tsubstaint seo an sprioc seo a bhaint amach go héifeachtach; Sa phróiseas eastósctha aigéid núicléasaigh, tá sé riachtanach freisin an t -aigéad núicléasach a dheighilt ón tuaslagán ina bhfuil eisíontais agus salainn, agus é a aistriú chuig maolán nua le haghaidh oibríochtaí ina dhiaidh sin. Tá sé infheidhme freisin maidir leis an scéal seo; Le linn chultúr na gceall, is gá uaireanta an meán cultúir nó an maolán a athsholáthar chun fás agus gníomhaíocht na gceall a choinneáil. Is féidir é a úsáid chun substaintí díobhálacha a bhaint ó shean -chultúr meáin nó ó mhaoláin agus ó na meáin chultúir nua nó na maoláin nua a thabhairt isteach.
Criathar móilíneach
I bpróisis taighde agus ullmhúcháin próitéine, is iondúil gur gá próitéiní sprice a dheighilt ó mheascáin chasta. Is féidir leis próitéiní a dheighilt bunaithe ar a méid, agus íonú próitéine a bhaint amach. Trí na coinníollacha truaillithe a choigeartú, mar shampla neart ian agus luach pH an t -uafás, is féidir éifeachtúlacht idirscartha próitéiní a bharrfheabhsú a thuilleadh. Chomh maith le próitéiní agus aigéid núicléasacha, is féidir é a úsáid freisin chun bithmhóilíní eile a dheighilt agus a íonú, amhail polaisiúicrídí, einsímí, antasubstaintí, etc. Cé nach n -úsáidtear an tsubstaint seo go díreach mar uirlis chun meáchan móilíneach a chinneadh, is féidir léi a bheith ina uirlis chúnta i gcinneadh meáchain mhóilíneach.
Sa phróiseas íonaithe próitéine, is iondúil go bhfuil sé riachtanach eisíontais mhóilín beag amhail salainn, meitibilítí móilíní beaga, ligandáin neamhcheangailte, etc. a bhaint ón tuaslagán próitéine. Is féidir leis an tsubstaint seo na heisíontais mhóilíneach bheaga seo a bhaint go héifeachtach ó réitigh próitéine, rud a fheabhsaíonn íonacht na bpróitéiní. Cuireann a éifeacht criathar mhóilíneach ar chumas na n -eisíontas móilín beag seo a bhaint go héifeachtach, agus mar thoradh air sin tá aigéid núicléasacha purer. Is iondúil go mbíonn eisíontais mhóilíneach beag mar fhoshraitheanna neamhghníomhaithe, coscairí, meitibilítí, srl. I measc na n -ullmhóidí einsímí, mar shampla foshraitheanna neamh -imoibrithe, coscairí, meitibilítí, srl. Trí scagachán glóthach an ábhair, is féidir na heisíontais mhóilíneacha bheaga seo a bhaint go héifeachtach agus is féidir íonacht ullmhúchán na heinsíme a fheabhsú. Chomh maith le próitéiní agus aigéid núicléasacha,
Insamhladh a dhéanamh ar tharchur comhartha idircheallach
Is é an trasdul comhartha idircheallach an lár -mheicníocht rialála de ghníomhaíochtaí saoil, a bhaineann le próisis chasta amhail aitheantas cille, tiontú comhartha, agus freagairt fiseolaíoch. Is minic a bhíonn taighde traidisiúnta ag brath ar mhúnlaí cille beo, ach tá teorainneacha ann amhail líonraí comhartha casta agus ilfhachtóirí cur isteach.Sephadex G75Is meán scagacháin glóthach dextran clasaiceach é. Soláthraíonn a struchtúr póiriúil agus a éifeacht criathar mhóilíneach samhail fhisiciúil uathúil chun trasdul comhartha idircheallach a ionsamhlú.
Samhail fhisiciúil chun trasdul comhartha idircheallach a ionsamhlú ag úsáid Sephadex G-75
Insamhladh ar acomhal bearna idircheallacha
Is cainéal hydrophilic é Acomhal Gap a fhoirmítear idir cealla in aice láimhe trí nascóir, ag ligean do mhalartú saor in aisce móilíní beaga le meáchan móilíneach<1500 Da. The pore size range of Sephadex G-75 (40-300 μ m) is much larger than that of intercellular junctions (about 1.5 nm), but its porous structure can simulate molecular diffusion processes in local microenvironments. For example:
Foirmiú grádáin móilíní comhartha: Déantar tiúchain éagsúla de mhóilíní comhartha (mar shampla Camp, CA ²+) a luchtú isteach sa cholún glóthach. Is féidir an difríocht idir an ráta idirleata de mhóilíní beaga sa phóir glóthach a bhreathnú tríd an éifeacht criathar mhóilíneach, agus is féidir tarchur grádán comharthaí ceimiceacha idir cealla a insamhladh.
Insamhladh freagartha sineirgíoch: Déantar dhá mhóilín idirghníomhacha (mar ligand agus gabhdóir) a luchtú ar an dá cheann den cholún glóthach faoi seach, agus déantar anailís ar a gcinéitic cheangailteach tríd an difríocht ama elution chun an próiseas aitheantais mhóilíneach a ionsamhlú sa chumarsáid teagmhála dhíreach idir cealla.
Insamhladh ar theagmháil mhóilíneach ar dhromchla membrane
Braitheann an chumarsáid idir móilíní dromchla membrane ar idirghníomhaíochtaí sonracha próitéiní dromchla cille membrane. Is féidir le Sephadex G-75 an próiseas seo a ionsamhlú trí mhodhnú feidhmiúil:
Turgnamh ceangailteach ligand gabhdóra: Tá próitéiní gabhdóra biotinylated (mar shampla EGFR) socraithe ar dhromchla na gcáithníní glóthach, déantar ligandáin lipéadaithe fluaraiseacha (mar shampla EGF) a ghabháil tríd an gcóras biotin streptavidin, agus déantar monatóireacht ar dhéine na gcomharthaí ceangailteacha le brathadóir fluaraiseacht chun an licín a cheadú.
Anailís ceangailteach iomaíoch: Déan an coimpléasc ligand gabhdóra sa cholún glóthach a réamhlódáil, cuir coscairí iomaíocha de chomhchruinnithe difriúla (mar shampla antasubstaintí frith -EGFR), ríomh an tairiseach toirmisc (KI) tríd an mbuaicphointe elution, agus insamhail éifeacht idirghabhála drugaí ar chosáin chomharthaí cille.
Insamhladh ar tharchur comhartha ceimiceach
Braitheann trasdul comhartha ceimiceach ar idirleathadh móilíní comharthaíochta ceimiceacha (mar hormóin agus cytokines) a chuirtear ar ceal trí shreabháin choirp nó maitrís eisilteach chun díriú ar chealla. Is féidir le sephadex G - 75 samhail idirleata tríthoiseach a thógáil:
Insamhladh an Chórais Paracrine: Déantar cealla rúnda (mar shampla macrophages) agus cealla sprice (amhail cealla T) a chuimsiú faoi seach i micreafáin fhoirmiú, agus breathnaítear ar stádas gníomhachtaithe na gcillíní sprice (mar abairt CD69) trí chultúr an CO chun éifeacht áitiúil comharthaí paracrine a insamhladh.
Tarchur comhartha inchríneacha: Déantar hormóin lipéadaithe fluaraiseacha (amhail inslin) a luchtú isteach sa cholún glóthach, agus déantar anailís ar a n -idirghníomhaíocht le pores glóthach tríd an am truaillithe, agus tuar an leath - saol hormóin i gcúrsaíocht fola agus dáileadh sprice orgáin trí shamhlacha matamaiticiúla a chomhcheangal.
Cás Iarratais Sephadex G-75 i dtaighde comharthaíochta cille
Taighde ar tharchur comhartha cille fola dearga agus feidhm integrin
Is é an gabhdóir greamaitheachta pláitíní integrin IIB 3 an glycoprotein is flúirsí ar dhromchla an scannáin pláitíní agus tá sé ríthábhachtach do hemostasis agus foirmiú thrombus. Déan staidéar ar úsáid Sephadex G-75 chun an idirghníomhaíocht idir pláitíní agus collagen subendothelial a ionsamhlú:
Múnla Gníomhachtaithe Integrin: Socraíodh an íonaithe íonaithe IIB 3 ar dhromchla na gcáithníní glóthach, agus cuireadh fibrinogen intuaslagtha (FG) leis mar ligand. Braitheadh an cinéitic cheangailteach trí athshondas plasmon dromchla (SPR). Fuarthas amach go raibh feabhas suntasach ar chleamhnas integrin go FG tar éis gníomhachtaithe (laghdaíodh KD ó μ m go NM).
Scagadh Drugaí Antiplatelet: Coimpléasc Preload Integrin FG i gColún Glóthach, cuir drugaí antiplatelet de chomhchruinnithe difriúla (amhail Tirofiban), ríomh an ráta toirmisc ar ghníomhaíocht integrin trí dhíláithriú buaic elution, agus soláthraíonn sé ard -- ardán scagthástála tréchuir d'fhorbairt na ndrugaí nua.
Rialú conairí comharthaíochta a bhaineann le meall
Cuireann cealla meall iomadú agus metastasis chun cinn trí ghníomhachtú neamhghnácha cosán comharthaíochta amhail MAPK agus PI3K/Akt. Is féidir Sephadex G-75 a úsáid chun príomhphróitéiní a leithlisiú agus a íonú i gcosáin chomharthaíochta:
Taighde Conair Comharthaíochta EGFR: Rinneadh próitéin EGFR a íonú le scagachán glóthach Sephadex G-75, agus rinneadh anailís ar a stádas fosfaictrithe ag mais-speictriméadracht. Fuarthas amach go raibh méadú suntasach tagtha ar leibhéal fosfaireachais Y1068 agus Y1086 de EGFR tar éis spreagadh EGF, a ghníomhaigh comharthaí ERK1/2 agus Akt le sruth.
Anailís ar Mheicníocht Friotaíochta Drugaí: I ndrugaí - Cealla ailse gastric frithsheasmhacha (SGC7901/VCR), bhí próitéin UHRF1 scoite amach agus íonaithe ag Sephadex G-75, agus fuarthas amach gur féidir le róshaothrú a bheith ag cur bac ar cheimitéis a laghdú (amhail Caspase-3) a laghdaíonn cam-ithosca-íogaireacht (amhail Caspase-3).
Comharthaíocht cille imdhíonachta agus rialachán polaisiúicríd
Feabhsaíonn polaisiúicrídí algaí dearga (BFP) freagra imdhíonachta trí na bealaí comharthaíochta NF - κ B agus MAPK a ghníomhachtú i macrophages. Taighde ar dheighilt agus íonú BFP agus a chomhpháirteanna (F1, F2, F3) ag baint úsáide as Sephadex G-75:
Polysaccharide component analysis: BFP, F1, F2 and F3 with purity>Fuarthas 95% trí scagachán glóthach Sephadex G-75 in éineacht le crómatagrafaíocht mhalartaithe ian Deae ceallalóis, agus ba iad a meáchain mhóilíneach ná 120 kDa, 85 kDa, 60 kDa agus 45 kDa, faoi seach.
Gníomhachtú Conair Comharthaí: Sa mhúnla macrophage RAW264.7, is féidir le BFP agus a chomhpháirteanna secretion NO agus TNF - a spreagadh go suntasach, agus is éard atá i gceist lena mheicníocht ná NF - κ B tras -aistriú núicléach agus fosfathúchán JNK, ERK, agus P38 MAPK. Léirigh na comhpháirteanna íonaithe atá scartha ag Sephadex G {- 75 go raibh an éifeacht ghníomhachtaithe is láidre ag F1 ar chosáin NF - κ B agus MAPK (gan aon táirgeadh a mhéadú faoi 2.5 uair agus TNF -secretion faoi 3 huaire).
Clibeanna Te: Sephadex G75 CAS 37224-29-6, soláthróirí, monaróirí, monarcha, mórdhíola, ceannach, praghas, mórchóir, le díol