Fluorescein isothiocyanateDearg oráiste, isothiocyanate buí fluaraiseacha, isothiocyanate fluaraiseacha dearg, isothiocyanate fluaraisín fluaraisín I, fluaraisín 5-isothiocyanate. Púdar buí. Tá sé hygroscopic. Féadann sé ceangal le próitéiní antasubstainte éagsúla, agus ní chailleann an antasubstaint tar éis an cheangail sainiúlacht an cheangail le hantaigin áirithe. Tá fluaraiseacht ghlas láidir aige fós i dtuaslagán alcaileach. Tar éis aigéad a chur leis, déanann sé é a mhaolú, agus imíonn an fhluaraiseacht. Tá sé beagán intuaslagtha in éitear aicéatón, éitear agus peitriliam. Is imoibrí bithcheimiceach é chomh maith le druga diagnóiseach leighis, ar féidir leis galair de bharr baictéir, víris, paraisítí, etc. a dhiagnóisiú go tapa. Tar éis aigéad a chur leis, déanann sé é a mhaolú, agus imíonn an fhluaraiseacht, agus tá sé beagán intuaslagtha in éitear aicéatón, éitear agus peitriliam.

|
Foirmle cheimiceach |
C21H11NO5S |
|
Aifreann Beacht |
389 |
|
Meáchan móilíneach |
389 |
|
m/z |
389 (100.0%), 390 (22.7%), 391 (4.5%), 391 (2.5%), 391 (1.0%), 392 (1.0%) |
|
Anailís eiliminteach |
C, 64.78; H, 2.85; N, 3.60; O, 20.54; S, 8.23 |
|
|
|

Staidéar a dhéanamh ar airíonnafluorescein isothiocyanateInsulin lipéadaithe le haghaidh geilitín aminated agus a chur i bhfeidhm i riarachán mhúcóis sróine:
Faoi choinníoll gan aon eiblitheoir seachtrach, scaipeadh an tuaslagán uiscí de ghelatin aminated in ola olóige, agus ullmhaíodh cineál nua micreafáin ghlóthach, micreafáin geilitín aminated, trí na próisis eiblithe, glóthach, díhiodráitiú agus cros-leithlisiú. Is é meánmhéid na gcáithníní de mhicreafáin ná 40-50 μ m. Déantar an méid a dháileadh go cothrom. Is féidir leis na micreafáin triomaithe thart ar 20 uair dá meáchan féin d'uisce a ionsú chun hidrigin a dhéanamh. Tá cion aimín níos airde ag micreafáin geilitín aimín ná micreafáin geilitín. Gearrtar iad go dearfach i dtuaslagán maolánach uisce driogtha agus fosfáite, agus is é an poitéinseal Zata in uisce driogtha ná 41.5 mV.
Leis an méadú ar chomhchruinniú glutaraldehyde nó an t -am imoibriúcháin crosghearrtha, tháinig laghdú ar an ábhar aimín de mhicreafáin. Mar sin féin, beag beann ar na coinníollacha imoibriúcháin crosghearrtha, tá ábhar aimín níos airde ag na micreafáin geilitín a ullmhaítear leis an modh seo ná na micreafáin geilitín. Is féidir micreafáin geilitín aimínithe a dhíghrádú go tapa (<1h) in the presence of trypsin, but slowly (>20h) i meán pepsin agus aigéad-bhunaithe. Tá an t -idirghníomhaíocht idir micreafáin geilitín aimínithe agus mucin níos láidre ná an idir micreafáin geilitín. Is é an dlús ardmhuirear dearfach de mhicreafáin geilitín aminated an phríomhchúis lena idirghníomhaíocht láidir le mucin. Rinneadh staidéar ar airíonna bith -bhith -ghreamaitheacha micreafáin geilitín aminated trí mhodh lipéadaithe fluaraiseachta agus trí theicneolaíocht díghrádaithe einsím in vitro, ag baint úsáide as an tsamhail níocháin gastric francach iargúlta agus turgnamh in vivo i bhfrancaigh.
The results showed that under the same experimental conditions, the number of aminated gelatin microspheres retained in the isolated rat stomach was more than that of gelatin microspheres, and the type of irrigation solution (artificial gastric juice or PH7 human phosphate buffer) had no significant effect on the gastric retention of microspheres, which indicated that the electrostatic interaction between the microspheres and gastric mucus was not the decisive factor for the Coinneáil gastric micreafafaí sa mhúnla seo. Mar sin féin, sa turgnamh, fuarthas amach gur tháinig laghdú ar an méid micreafafaí geilitín a coinníodh sa bholg francach iargúlta leis an méadú ar an tiúchan den ghníomhaire crosghearrtha glutaraldehyde nuair a bhí sé ag ullmhú na micreafáin a thug le fios go bhféadfadh an t -aigne a bhaineann le hais -gheal an mhiocróp a chur i bhfeidhm ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion ar an gcion a d'fhéadfadh a bheith ann go bhféadfadh sé go bhféadfadh sé go bhféadfadh sé go bhféadfadh sé go bhféadfadh sé crosghearradh.
Léirigh na torthaí turgnamhacha in vivo i bhfrancaigh go raibh greamaitheacht mhúcóis níos fearr ag micreafáin geilitín aimín ná micreafáin geilitín. Rinneadh imscrúdú ar na héifeachtaí a bhaineann le geilitín aimínithe ar ionsú sróine glucan agus insulin i bhfrancaigh shláintiúla. Léirigh na torthaí go bhféadfadh geilitín aimín 0.2% (WN) ionsú fluaraisín isothiocyanat glucan a chur chun cinn go suntasach ó mhúcóis na sróine francach le bith -infhaighteacht de 23.8%. Tar éis riarachán intranasal de 10 maolán fosfáite insulin IU ina bhfuil {0 2% (w/v) geilitín aimín, bhí an leibhéal glúcóis fola i bhfad níos ísle ná an leibhéal maoláin fosfáite insline.

Fluorescein isothiocyanate(FITC), mar imoibrí lipéadaithe fluaraiseacha clasaiceach, tá sé ina uirlis fíor -riachtanach i réimsí na bitheolaíochta, na míochaine, agus na heolaíochta ábhair mar gheall ar a thoradh ardchandamach, a fhóta -inmharthanacht den scoth, agus a dhea -chomhoiriúnacht mhaith.
Is féidir leis an ngrúpa isothiocyanate (- n=C {= s) FITC dul faoi fhrithghníomhartha comhfhiúsacha le grúpaí gníomhacha ar nós grúpaí aimín agus thiol i mbithmhóilíní, ag cruthú coimpléisc lipéadaithe fluaraiseacha cobhsaí. Fágann an tréith seo gurb é an t -imoibrí is fearr é le haghaidh próitéine, aigéad núicléasaigh, agus lipéadú peiptíde.
Lipéadú próitéine agus taighde feidhmiúil
Baineann FITC lipéadú sonrach amach trí cheangal a dhéanamh ar iarmhair lísín próitéiní amhail antasubstaintí agus lectins. Mar shampla, i dturgnaimh imdhíonfhluaraiseacht, is féidir le antasubstaintí lipéadaithe FITC ceangal le hantaiginí dromchla cille agus anailís a dhéanamh go cainníochtúil ar leibhéil léirithe antaiginí trí mhicreascópacht fhluaraiseacht nó cytometry sreafa. Taispeánann na sonraí turgnamhacha go bhfuil baint líneach ag déine fluaraiseachta FITC IgG comhchuingeach leis an tiúchan antaigin, agus is féidir leis an íogaireacht braite teacht ar leibhéal Danak. Ina theannta sin, is féidir próitéiní lipéadaithe FITC a úsáid le haghaidh staidéar idirghníomhaíochta próitéine, amhail anailís a dhéanamh ar athruithe comhréireacha próitéine trí theicneolaíocht aistrithe fuinnimh athshondais fhluaraiseacht (FRET).
Lipéadú aigéid núicléasaigh agus hibridiú móilíneach
Is féidir FITC a mhodhnú go ceimiceach chun deireadh a chur le deireadh 5 'nó 3' aigéid núicléasacha le haghaidh teicneolaíocht fhluaraiseacht in hibridiú situ (FISH). I dtaighde ailse, is féidir le tóireadóirí lipéadaithe FITC ceangal sonrach a dhéanamh le réigiúin neamhghnácha crómasómacha chun cabhrú le diagnóis galair haemaiteolaíocha amhail leoicéime agus lymphoma. Mar shampla, is féidir le tóireadóirí FITC a dhíríonn ar ghéinte comhleá BCR-ABL comharthaí fluaraiseacha buí a thaispeáint i núicléas cille idirbhriste le ráta cruinnis de níos mó ná 95%.
Lipéadú peiptíde agus seachadadh drugaí
Tá ról tábhachtach ag peiptídí lipéadaithe FITC i gcórais seachadta drugaí. Ag glacadh M2PEP-FITC mar shampla, tá an móilín seo comhdhéanta de peiptíd M2PEP dírithe agus grúpa fluaraiseacha FITC, ar féidir leis a aithint go sonrach gabhdóirí dromchla cille meall agus seachadadh spriocdhírithe drugaí a bhaint amach. Tá sé léirithe ag turgnaimh go bhfuil carnadh liposomes lipéadaithe M2PEP-FITC i bhfíocháin meall 3.2 uair níos mó ná drugaí saor in aisce, rud a fheabhsaíonn éifeachtúlacht theiripeach agus fo-iarsmaí a laghdú.
Mar gheall ar airíonna fluaraiseachta FITC, is é an “caighdeán óir” é i réimse na diagnóisice in vitro, a úsáidtear go forleathan i dteicnící amhail imdhíonmhéamatagrafaíocht, cytometry sreafa, agus ELISA.
Pataiginí a bhrath go gasta
Is féidir antasubstaintí lipéadaithe FITC a úsáid chun ionfhabhtuithe baictéaracha, víreasacha agus seadánacha a dhiagnóisiú go tapa. Mar shampla, i ndiagnóis maláire, tá antasubstaintí frith -maláire lipéadaithe ag FITC le smearadh fola an othair, agus breathnaítear ar chomhartha fluaraiseachta glas an seadáin trí mhicreascópacht fhluaraiseacht. Déantar an t -am braite a ghiorrú ó 2 uair an chloig i modhanna traidisiúnta go 15 nóiméad, agus sroicheann an íogaireacht 98%. Ina theannta sin, is féidir úsáid a bhaint as tóireadóirí aigéid núicléasaigh lipéadaithe FITC freisin chun aigéid núicléasacha víreas riospráide a bhrath, mar shampla géine ORF1AB SARS-COV-2, le sainiúlacht 99.2%.
Marcóirí meall
I gcíteatracht sreafa,Fuorescein isothiocyanateIs féidir le hantasubstaintí frith-CD45 lipéadaithe idirdhealú a dhéanamh idir cealla leoicéime ó ghnáthchealla fola. Taispeánann na sonraí gurb é an ráta dearfach de chuid FITC lipéadaithe CD34 i ndiagnóisiú leoicéime géarmhíochaine myeloid (AML) ná 85%, atá 20% níos airde ná scrúdú moirfeolaíoch traidisiúnta. Maidir le scagthástáil luath ar siadaí, is féidir le teicneolaíocht bhrath cealla meall a scaiptear le FITC cealla meall (CTC) cealla meall a ghabháil i dtiúchan an -íseal i bhfuil imeallach, ag soláthar modh nua le haghaidh diagnóis luath ar siadaí soladacha amhail ailse chíche agus ailse scamhóg.
Diagnóis ar ghalair uath -imdhíonachta
I dteicneolaíocht ELISA, is féidir úsáid a bhaint as autoantibodies lipéadaithe FITC (mar shampla antasubstaintí frith -núicléacha agus antasubstaintí DNA frith -dhúbailte) chun galair a dhiagnóisiú amhail erythematosus lupus sistéamach (SLE). Tá sé léirithe ag turgnaimh go bhfuil íogaireacht 92% ag FITC-ELISA agus sainiúlacht 95% chun antasubstaintí frith-SM a bhrath, atá i bhfad níos fearr ná modhanna traidisiúnta imdhíonfhluaraiseacht.
Mar gheall ar thréscaoilteacht na gceall agus ar thocsaineacht íseal FITC, is uirlis idéalach é le haghaidh íomháú cille, a úsáidtear go forleathan i logánú orgalle, breathnóireacht rannán cille, agus taighde apoptosis.
Lipéadú orgánach cille agus breathnóireacht dhinimiciúil
Is féidir le FITC tóireadóirí mitochondrial (mar shampla mitotracker glas) a cheangal go sonrach le poitéinseal membrane mitochondrial agus monatóireacht a dhéanamh ar athruithe moirfeolaíocha mitochondrial i bhfíor-am. I dtaighde neuronal, is féidir le FITC antasubstaintí próitéine microtubule lipéadaithe a thaispeáint an síneadh dinimiciúil ar chóin fáis axon, ag nochtadh meicníocht na forbartha néarach. Ina theannta sin, is féidir úsáid a bhaint as tóireadóirí lipéadaithe lipéadaithe FITC (lysotracker glas) chun staidéar a dhéanamh ar phróisis autophagy, ag cainníochtú líon na n -autophagosomes trí athruithe ar dhéine fluaraiseachta.
Timthriall cille agus anailís apoptosis
I gcíteatracht sreafa, is féidir le FITC lipéad propidium iaidíd (PI) ceangal le DNA agus idirdhealú a dhéanamh idir céimeanna éagsúla den timthriall cille (G0/G1, S, G2/M) trí dhéine fluaraiseachta. Taispeánann sonraí turgnamhacha gurb é íogaireacht an mhodha staining dúbailte FITC-PI chun apoptosis cille a bhrath ná 98%, atá 30% níos airde ná an modh traidisiúnta staining gorm. Ina theannta sin, is féidir le tóireadóirí iarscríbhinne V FITC ceangal go sonrach le phosphatidylserine atá nochta ar dhromchla na gceall apoptotic, ag baint amach cealla apoptotic luatha.
Taighde ar imirce agus ar ionradh cille
I dturgnaimh Transwell, is féidir le cealla lipéadaithe FITC monatóireacht a dhéanamh ar an bpróiseas imirce i bhfíor-am. Mar shampla, sa staidéar ar metastasis meall, tá an ráta imirce de chealla ailse chíche lipéadaithe FITC (MCF-7) tríd an gliú maitríse comhghaolaithe go dearfach leis an gcumas ionraidh, ag soláthar táscairí cainníochtúla chun drugaí frith-meall a scagadh.
Tá róil iomadúla ag FITC i bhforbairt drugaí, lena n -áirítear bailíochtú sprice, meastóireacht ar chóras seachadta drugaí, agus staidéir chógaschinéiteacha.
Sprioc Bailíochtú agus Meicníocht Taighde Gníomhaíochta
Is féidir úsáid a bhaint as coscairí móilíní beaga atá lipéadaithe chun spriocanna drugaí a bhailíochtú. Mar shampla, is féidir le FITC coscairí EGFR lipéadaithe (mar shampla gefitinib) a léiriú ceangal drugaí le gabhdóirí EGFR ar dhromchla na gceall meall, ag cainníochtú an ghaolmhaireachta ceangailteach (luach KD) trí dhéine fhluaraiseacht. Ina theannta sin, is féidir FITC lipéadaithe siRNA a úsáid freisin chun staidéar a dhéanamh ar éifeachtúlacht tosta géine, ag soláthar bonn do theiripe cur isteach RNA.
Meastóireacht ar Chóras Seachadta Drugaí
Is féidir le FITC nanacháithníní lipéadaithe (ar nós liposomes agus micreafafaí polaiméire) monatóireacht a dhéanamh ar dháileadh agus ar iompar drugaí in vivo i bhfíor-am.
Tá sé léirithe ag turgnaimh go bhfuil carnadh FITC lipéadaithe liposomes PEGylated i bhfíocháin meall 2.8 uair níos mó ná drugaí saor in aisce, agus is féidir leis an gcomhartha fluaraiseachta fanacht ar feadh 24 uair an chloig, ag soláthar sonraí amhairc chun córais seachadta drugaí a bharrfheabhsú.
Staidéir chógaschinéiteacha agus tocsaineolaíocha
Is féidir anailís chainníochtúil a dhéanamh ar mhóilíní drugaí atá lipéadaithe go cainníochtúil ar phróisis ionsúcháin, dáileacháin, mheitibileachta agus eisfhearadh (ADME) in vivo trí theicneolaíocht íomháithe fluaraiseachta. Mar shampla, tá déine fluaraiseachta antaibheathach lipéadaithe FITC (mar vancomycin) sna duáin bainteach go líneach le tiúchan drugaí, ag soláthar bonn chun dáileog drugaí a bharrfheabhsú. Ina theannta sin, is féidir le FITC measúnachtaí cíteatocsaineachta lipéadaithe a mheas freisin maidir le damáiste drugaí do ghnáthchealla agus meastóireachtaí sábháilteachta a threorú.
Fágann tréithe freagartha fluaraiseachta FITC go bhfuil sé infheidhme go sainiúil i réimse na heolaíochta ábhar, lena n -áirítear braiteoirí pH, braiteoirí teochta, agus tóireadóirí ian miotail a fhorbairt.
Braiteoir fluaraiseachta sofhreagrach pH
Déine fhluaraiseachtfluorescein isothiocyanate is significantly affected by the pH value of the solution. In weakly acidic environments (pH 5.0-6.5), protonation of FITC groups leads to increased fluorescence intensity; Under alkaline conditions (pH>8.0), déantar fluaraiseacht a mhúchadh. Bunaithe ar an tréith seo, is féidir nanacháithníní modhnaithe FITC a úsáid chun monatóireacht a dhéanamh ar luaineachtaí intracellular aigéid. Mar shampla, tá déine fluaraiseachta choimpléasc fitc biliribin i micro -chomhshaol meall 2.3 uair níos mó ná gnáthfhíochán, ag soláthar modh nua do dhiagnóis meall.
Probe fluaraiseacha sofhreagrach teochta teochta
Athraíonn saolré fluaraiseachta FITC le teocht. Faoi choinníollacha ísealteochta (4 chéim), leathnaítear saolré fluaraiseachta Micreafóin polaiméire FITC go 5.2 nanoseconds, atá 1.8 uair níos airde ná teocht an tseomra (25 céim). Fágann an tréith seo gur uirlis idéalach é chun staidéar a dhéanamh ar phróisis trasdula chéime agus caomhnú cille.
Tóireadóir braite ian miotail
Laghdaíonn FITC déine fluaraiseachta go mór nuair a chuirtear in éineacht le hiain mhiotail ar nós Cu ² ⁺ agus Hg ² ⁺, rud a fhágann go bhfuil sé oiriúnach do mhonatóireacht chomhshaoil. Mar shampla, tá teorainn braite de 0.1 nm le haghaidh Hg ² ⁺ in uisce, atá 100 uair níos airde ná speictreascópacht ionsú adamhach traidisiúnta ag nanacháithníní glóthach shilice modhnaithe FITC.
Tá cur i bhfeidhm FITC sa réimse talmhaíochta ag leathnú de réir a chéile, lena n -áirítear braite víreas plandaí, diagnóis galar ainmhithe, agus sainaithint íonachta éagsúlachta.
Brath tapa víris plandaí
Is féidir antasubstaintí víreas lipéadaithe FITC a úsáid chun víreas mósáic tobac (TMV), víreas mósáic cúcamar (CMV), agus víris eile a bhrath. Tá sé léirithe ag turgnaimh gurb é íogaireacht FITC-ELISA chun TMV a bhrath ná 0.1 ng/ml, atá 10 n-uaire níos airde ná modhanna traidisiúnta séireolaíochta. Ina theannta sin, is féidir úsáid a bhaint as tóireadóirí aigéid núicléasaigh FITC chun géinte exogenous a bhrath i mbarr géinmhodhnaithe, amhail géinte BT atá frithsheasmhach in aghaidh feithidí.
Diagnóis ar ghalair ainmhithe
Is féidir antasubstaintí lipéadaithe FITC a úsáid chun víreas fiabhras muc (CSFV), víreas fliú éanúil (AIV), agus víris eile a bhrath.
I ndiagnóisiú fiabhras na muc, tá antasubstaintí frith -CSFV lipéadaithe ag FITC le rannóga fíochán agus breathnaigh ar dháileadh víreas trí mhicreascópacht fhluaraiseacht, ag laghdú an ama braite ó mhodhanna traidisiúnta 3 lá go 6 uair an chloig. Ina theannta sin, is féidir cytometry sreafa lipéadaithe FITC a úsáid freisin chun cealla T pataigine a bhrath i bhfuil ainmhithe agus déine freagartha imdhíonachta a mheas.
Aitheantas íonachta éagsúlachta
Is féidir úsáid a bhaint as tóireadóirí DNA lipéadaithe FITC chun íonacht na gcineálacha barr a aithint. Mar shampla, is féidir leis an tóireadóir FITC a dhíríonn ar ghéin friotaíochta galar ríse rís idirdhealú cruinn a dhéanamh idir homaighnéasaigh agus heitrisigí i síolta ríse hibrideacha, le cruinneas aitheantais íonachta de 99.5%. Ina theannta sin, is féidir úsáid a bhaint as marcóirí móilíneacha SSR lipéadaithe FITC le haghaidh anailíse éagsúlachta géinití ar phórtha beostoic agus éanlaithe, ag soláthar bonn eolaíoch le haghaidh pórúcháin.

Sintéis FITC: Imoibríonn ainhidríd 4-nitrophthalic (féach C8H3NO5, [5466-84-2]) le resorcinol ag céim 195-200 C do 10H, téann sé i meascán de 3 'nitrfluorescin le hiodráití le hiodráití le hiodráití le hiodráití le hiodráití le hiodráití le hiodráití le hiodráitídí nitrfluorescin le hiodráitídí nitrofleorescin le hiodráití a bhfuil hidreaflóim acu le hiodráití a bhfuil hidreafleorescin acu le hiodráitiú Tuaslagán eatánóil, 4 "Faightear nitrofluorescein ansin.fluorescein isothiocyanate.

Is púdar criostalach buí nó oráiste é an táirge íon FITC, atá intuaslagtha go héasca in uisce agus tuaslagóir alcóil. Tá dhá isiméir ann, ina bhfuil cineál isiméirí I níos fearr in éifeachtúlacht, i gcobhsaíocht agus i gceangal próitéine. Is é an meáchan móilíneach FITC ná 389.4, is é an tonnfhad ionsúcháin uasta ná 490 ~ 495 nm, agus is é an tonnfhad astaíochta uasta ná 520 ~ 530 nm, ag taispeáint fluaraiseacht ghlas ghlas buí. Is féidir FITC a stóráil le blianta fada in áiteanna fuar, dorcha agus tirim, agus is é an fluaraisín is mó a úsáidtear. Is é an buntáiste is mó atá aige ná go bhfuil an tsúil dhaonna níos íogaire do ghlas buí, agus is iondúil go mbíonn an fhluaraiseacht ghlas san eiseamal rannóige níos lú ná dearg.
Clibeanna Te: Fluorescein Isothiocyanate CAS 27072-45-3, soláthróirí, monaróirí, monarcha, mórdhíola, ceannach, praghas, mórchóir, le díol




